[发明专利]一种以叶酸和WGA为靶向因子的石墨烯药物载体的制备方法

说明书

本发明涉及一种由氧化石墨烯、6‑羧甲基‑γ‑环糊精、叶酸和麦胚凝集素(WGA)为主要原料制备的具有叶酸和麦胚凝集素双重靶向因子的石墨烯纳米药物载体及其制备方法。本发明首先以氧化石墨烯和对甲苯磺酰氯为原料，使氧化石墨烯羟基活化，接枝L‑赖氨酸，用水合肼将接枝有赖氨酸的氧化石墨烯还原；然后将其在1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)和N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)的共同催化下，与6‑羧甲基‑γ‑环糊精和叶酸反应，生成同时接枝有γ‑CD和叶酸的纳米石墨烯，再将麦胚凝集素与γ‑CD组装，制备具有叶酸和麦胚凝集素双重靶向因子的石墨烯纳米药物载体。

技术领域

本发明属药物制剂领域，特别是涉及一种由氧化石墨烯、6-羧甲基-γ-环糊精、叶酸和麦胚凝集素(WGA)为主要原料制备的具有叶酸和麦胚凝集素双重靶向因子的石墨烯纳米药物载体的制备方法。

背景技术

在近几十年，人们研究了不同尺寸、形状和化学组成的各种纳米材料作为治疗药物的纳米载体，包括金属和金属氧化物的纳米粒子、聚合物胶束、脂质体、树枝状聚合物和碳纳米管。其中，由于性质上的优势，作为一种新的、有竞争力的药物输送系统，石墨烯和氧化石墨烯在系统的、靶向的、局部的药物输送系统上有很大的应用潜力。石墨烯的比表面积大，药物装载能力高。由于其特殊的共轭结构，使其在负载药物，特别是抗癌药物方面表现优越。但石墨烯刚度太大，对正常细胞会产生一定程度的损害。另外石墨烯高度疏水，在水溶液中的分散性有限。对石墨烯表面进行载药因子和靶向因子接枝改性，不但能克服上述存在的问题，还能使其具有载药和多重主动靶向的能力。

本发明以氧化石墨烯、6-羧甲基-γ-环糊精、叶酸和麦胚凝集素为主要原料，制备了一种具有叶酸和麦胚凝集素双重靶向因子的石墨烯纳米药物载体。

发明内容

本发明首先以氧化石墨烯和对甲苯磺酰氯为原料，使氧化石墨烯羟基活化，接枝L-赖氨酸，用水合肼将接枝有赖氨酸的氧化石墨烯还原；然后将其在1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)的共同催化下，与6-羧甲基-γ-环糊精和叶酸反应，生成同时接枝有γ-CD和叶酸的纳米石墨烯，再将麦胚凝集素与γ-CD组装，制备具有叶酸和麦胚凝集素双重靶向因子的石墨烯纳米药物载体。

具体实施方式

实施例1

(1)酰氯化氧化石墨烯

将10.00g氧化石墨烯(纯度99％，厚度：≤5nm，尺寸：2-8um)分散于100ml氯仿中，升温至55℃，搅拌下分别缓慢滴入5.50g二氯亚砜和2.00gN-甲基吡咯烷酮，升高温度至沸腾，回流反应3h，降温至25℃，3000转/分钟，离心10分钟，倾去上清液，刮出沉淀，冷冻干燥，得褐色固体粉末，保存，备用；

(2)L-赖氨酸接枝氧化石墨烯

将5.00gL-赖氨酸加入到50ml蒸馏水中，25℃下搅拌溶解后，降温至10℃，缓慢加入步骤(1)的产物，搅拌反应5h，再升温至30℃，继续搅拌反应2h，冷却至25℃，过滤，无水乙醇洗涤3次，冷冻干燥，得白色固体粉末，备用麦胚凝集素；

(3)L-赖氨酸接枝氧化石墨烯的还原

于25℃温度下，取100ml蒸馏水，通入N₂10分钟，加入20.00gL-抗坏血酸，在N₂流下搅拌溶解后，加入上述步骤(2)的样品5.00g，保持温度在25℃，搅拌反应24h，过滤，蒸馏水洗涤6次，真空干燥，得黑色固体粉末，备用；

(4)6-羧甲基-γ-环糊精和叶酸的接枝