[发明专利](S)-选择性生物催化剂

说明书

本发明公开(S)‑选择性生物催化剂，具体涉及一株海洋来源橘青霉Penicillium citrinum 4620，保藏号为GDMCC No：60349。以该菌株的静息细胞及生长细胞为生物催化剂，催化共轭C＝C双键的不对称还原制备光学活性的带吸电子基团饱和化合物。本发明所述的菌株立体选择性高且新颖，生物转化工艺简单、安全，成本低廉，环境友好，而且产物容易纯化，具有工业应用前景。

技术领域

本发明属于生物化工领域，涉及(S)-选择性生物催化剂，具体涉及一株海洋来源橘青霉及其用于不对称转化含有共轭C＝C双键的化合物获取光学活性的带吸电子基团饱和化合物的方法。

技术背景

带有吸电子基团的饱和化合物是医药、激素、香料、以及农药生产等方面的重要物质，常常需要由其α,β-不饱和化合物选择性还原获得，但吸电子基团易使烯烃钝化，对其进行选择性还原是一个富有挑战性的课题。化学合成中最常用过渡金属及其络合物对该类化合物还原，此法存在成本高，条件苛刻，产率低、会污染环境等缺点。因此，利用生物催化法催化共轭C＝C双键的不对称还原制备光学活性的带吸电子基团饱和化合物成为研究的热点。然而，目前各种已报道的不同的生物催化剂却表现出相同的立体选择性，催化还原茶香酮仅产生相同的(R)-异构体产物。

本发明旨在发现与获取能产生相反异构体产物的(S)-选择性生物催化剂，(S)-选择性生物催化剂与已有的(R)-选择性生物催化剂相结合，可满足不同手性物质各个异构体的制备需求，这在手性药物开发生产方面尤为重要。

发明内容

本发明一方面提供一种新的(S)-选择性生物催化剂。

本发明另一方面提供一种不对称催化还原共轭C＝C双键制备(S)-构型带吸电子基团饱和化合物的方法。

本发明的技术方案如下：

一种新的(S)-选择性生物催化剂为一株海洋来源橘青霉Penicillium citrinum4620，已于2018年4月9日保藏在广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏号为GDMCC No：60349。

所述橘青霉Penicillium citrinum 4620属于曲霉属，是发明人从海百合样品中，经过初筛、复筛及分离纯化得到。

橘青霉的菌株是从广东珠海淇澳岛、广东深圳大亚湾、广东徐闻角尾乡、广东湛江角尾乡等海域采集的500多份海百合匀浆液中筛选得到的，筛选的具体步骤如下：从不同的环境中采集海百合样品，经过研磨、无菌水稀释、富集培养、分离纯化、活性筛选，筛选共轭烯键还原酶产生菌，通过反复筛选，分离得到。

所述橘青霉具有如下的微生物学特质：

1、形态大小

绒状兼粉末状，在近边缘呈现颗粒状；直径20mm～70mm。

2、适宜生长环境

适宜的生长温度为25～35℃，优选28℃；可以在pH 5～9，优选pH 8环境中生存。

3、平板培养菌落特性

在28℃平板上培养3天可形成小的菌落，5天形成暗黄绿色，甚至橄灰色菌落，边缘不规则，有同心环。

根据“伯杰氏鉴定手册”提供的鉴定方法和上述的微生物学特征，并经16SrDNA鉴定，确认该菌株为橘青霉(Penicillium citrinum)，标号为Penicillium citrinum 4620。

本发明另一方面提供所述橘青霉Penicillium citrinum 4620用于不对称还原α,β-不饱和化合物，制备具有(S)构型的带吸电子基团化合物的方法，所述α,β-不饱和化合物的结构式如式(I)所示