[发明专利]一种阳离子大孔树脂精制黑木耳多糖的方法

说明书

本发明公开了一种阳离子大孔树脂精制黑木耳粗多糖的方法，属于生物技术领域。本方法包括如下步骤：A.原料的预处理；B.热水浸提制备粗多糖；C.大孔树脂732阳离子树脂处理；D.透析除去小分子；E.真空冷冻干燥；制备得精制的黑木耳粗多糖。该方法可去除大部分蛋白和小分子杂质，适合工业化生产黑木耳多糖。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体是涉及一种采用732阳离子树脂精制黑木耳粗多糖的方法。

背景技术

黑木耳[Auricularia auricular(L.ex Hook)Underw]又名木菌、树鸡、黑菜，是我国珍贵的药用和食用真菌，属于木耳系真菌类担子菌纲。主产于黑龙江省大、小兴安岭，吉林长白山等地。研究表明，黑木耳多糖是黑木耳中最有效的活性成分之一，具有增强机体免疫力、抗氧化、抗衰老、防癌、抗癌等生物学功能，已成为国内外研究的热点领域之一。但目前对黑木耳多糖分离纯化的研究不够完善。

由于多糖的组成复杂性，多糖粗提物的分子大小不完全相同，而且提取后的黑木耳粗多糖中含有一定量的蛋白，色素和小分子物质，影响多糖的化学结构的进一步研究，因此有必要对粗多糖进一步分离纯化，但是去除粗多糖中的蛋白质的传统方法以Sevage法为主，此法采用的有机溶剂有毒性，可能会影响多糖的生物活性，也不适宜将通过这种方法纯化过的粗多糖用于制备食品或者药品。

大孔树脂具有大孔立体三维网状结构和较大的比表面积，其内部的孔隙又多又大，活性中心多，离子扩散速度较快，离子交换速度也快，因此具有良好的交换吸附活性。近年来广泛应用于天然产物的活性成分的精制，某些大孔树脂已经用到多糖中的去蛋白研究中，取得了很好的效果。本法所采用的732阳离子大孔树脂，具有和大孔吸附剂相同的骨架结构，在大孔吸附剂合成后，再引入化学功能基团后的得到的强酸性阳离子树脂，其会以氢离子交换碰到的各种阳离子，因此可以更好的吸附蛋白质和多糖。但是在不同的条件下，蛋白质和多糖的吸附效果不同，可利用此性质，分离多糖和蛋白质。

采用离子交换树脂法去除蛋白质的操作简单，所需设备简单，成本低，缩短生产周期，处理量大，且不会有有机试剂残留的问题，适用于大规模工业化生产。且其不仅能去除蛋白质，对于脱色也有一定作用。

有关黑木耳多糖制备方面的专利有，专利1：木耳多糖的提取方法(申请公开号CN106589156A)就是采用Sevage法去蛋白；专利2：一种木耳多糖的制备方法(申请公开号CN107177007A)是采用多种酶的配合使用，提高多糖的降血脂活性，对于是否除去蛋白质未提及。

发明内容

本发明的目的是提供一种精制黑木耳粗多糖的工艺，本发明的核心技术是：应用阳离子交换吸附树脂代替传统的Sevage法，适合规模化产业化制备黑木耳粗多糖。

本发明采用的技术方案如下：

采用732阳离子树脂精制黑木耳粗多糖，包括如下步骤：A.原料的预处理；B.热水浸提制备粗多糖；C.大孔树脂732阳离子树脂处理；D.透析除去小分子；E.真空冷冻干燥；制备得精制的黑木耳粗多糖。

前面所述的方法，优选的方案是，步骤A.原料的预处理是指，取干燥的黑木耳用热水泡发2-4h，取泡发后的黑木耳置于榨汁机中，加入1:1.5-3的水将原料打碎。

前面所述的方法，优选的方案是，步骤B.热水浸提制备粗多糖是指，将打碎后的原料按固液比1:80-100加入水，水的pH为8-10，在90℃水浴锅中提取4h，4层纱布过滤，将滤渣重复浸提2次，合并每次的滤液，在4000rpm/min条件下离心20min，得黑木耳粗多糖的提取液。