[发明专利]液相色谱质谱分析方法和液相色谱质谱分析装置

说明书

液相色谱质谱分析方法和液相色谱质谱分析装置。[课题]对包含各种化合物的试样进行LC/MS分析时，改善各化合物的离子化效率而提高检测灵敏度。[解决手段]在柱后添加部16中，添加剂送液泵164A、164B从容器163A、163B分别抽吸不同种类的添加剂A、B并进行供给，使其通过三通接头162、161而混入至洗脱液中。添加剂的组合优选为能够获得带电状态的聚集效果的DMSO与具有促进液滴微细化和气化的效果的2‑丙醇的组合。通过使这两种添加剂按照预先确定的流量程序以适当的流量比进行混合并混入至洗脱液中，能够使将洗脱液从ESI喷雾器21进行带电喷雾且离子化时的离子化效率呈现就各化合物而言接近最佳的状态。由此，检测灵敏度与以往相比也提高。

技术领域

本发明涉及利用液相色谱质谱分析装置进行的分析方法以及适合于该分析方法的液相色谱质谱分析装置，所述液相色谱质谱分析装置使用质谱分析装置来作为液相色谱仪的检测器。

背景技术

就液相色谱质谱分析装置(以下有时简写为“LC-MS”)而言，为了将从液相色谱仪的柱送出的洗脱液中的化合物进行离子化，可以使用电喷雾离子化(ESI)法、大气压化学离子化(APCI)法、大气压光离子化(APPI)法等所谓的大气压离子化(API)法。就使用了大气压离子化法的大气压离子源而言，利用喷雾器喷嘴将洗脱液喷雾至大致大气压气氛中，将由该喷雾生成的微细液滴中的化合物进行离子化而生成气体离子。因此，为了提高离子化效率，重要的是促进所喷雾的液滴的微细化、气化。

向大气压离子源中导入的洗脱液大多是液相色谱仪所使用的流动相，但水、醇类、乙腈(ACN)等基本的流动相会有无法呈现适于利用大气压离子源进行良好离子化的特性的情况。因而，就LC-MS而言，为了改善离子化效率，根据试样的特性、所使用的流动相的种类或离子化法的种类等，经常使用适当的试剂来作为向流动相中添加的添加剂(参照非专利文献1等)。一般来说，这样的添加剂被混合至流动相的情况较多，但存在对液相色谱仪的柱的分离特性造成影响的可能时，可以使用向从柱出口洗脱的洗脱液中混入试剂而不向导入至柱之前的流动相中混入试剂的所谓柱后法(post column method)(参照专利文献1等)。

利用柱后法来添加试剂的情况下，在其添加时刻，试样中的化合物已经发生分离，因此，不仅该试剂的种类、添加量较为重要，适当地设定与化合物相符的添加时机也是重要的。这是因为：即使是相同的试剂，其有效性的程度也会因化合物的特性或其浓度而异。此外，在梯度分析的情况下，由于流动相的混合比随着时间的经过而发生变化，因此会有即使是相同的试剂，其有效性的程度也会随之改变的情况。此外，在柱后法的情况下，如果增加试剂的添加量，则向大气压离子源中导入的洗脱液的液量自身会增加，因此，未必例如挥发性高的试剂添加得越多则离子化效率越会提高。

然而，对包含特性不同的各种化合物的试样进行测定之类的情况下，难以按照这些各种化合物分别能够实现高离子化效率的方式来设定试剂的添加条件。因此，在以往的LC-MS中，试剂的添加条件对于各种化合物而言未必优化至呈现离子化效率最佳或接近最佳的状态，因此会有牺牲质谱分析装置的检测灵敏度的情况。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2004-125453号公报(第[0021]段)

非专利文献

非专利文献1：《关于LC-MS之四“对于分离和离子化而言重要的流动相”》，株式会社岛津制作所，[online]，[2017年4月17日检索]，因特网＜URL：http：//www.an.shimadzu.co.jp/hplc/support/lib/lctalk/57/57intro.htm＞

非专利文献2：Anthony T.Iavarone和另外2人，《Supercharged Protein andPeptide Ions Formed by Electrospray Ionization》，Anal.Chem.，2001年，Vol.73，PP.1455-1460