[发明专利]一种香水百合组织培养快速繁殖方法

说明书

本发明公开了一种香水百合组织培养快速繁殖方法，其特征在于包括以下步骤：(1)外植体的取材与消毒；(2)无菌株的获取；(3)脱分化及分化培养；(4)炼苗移栽。与现有技术相比，本发明技术方案的有益效果是：本发明通过生物技术对香水百合进行组织培养快速繁殖，在短时间内培育出大量可供大田栽培的香水百合种苗，显著提高了香水百合种苗的繁殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。

技术领域

本发明涉及一种香水百合组织培养快速繁殖方法。

背景技术

百合(Lilium spp.)是百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)多年生球根花卉，其花大、花色丰富、花形优美、寓意纯洁而深受人们喜爱，是当今世界上重要的切花品种之一。西方人以百合为圣洁象征，在公元约1000年前以色列国王所罗门的寺庙柱顶就是用百合花作装饰。百合花的花名是为了纪念圣母玛利亚，自古以来圣母就被基督教视为清纯的象征，因此它的花语就是纯洁。目前全世界约有100多种百合品种，我国栽培约有60多种。百合切花是目前世界上发展最快的花卉之一。香水百合是百合中的一种，别名卡萨布兰卡，天上百合，原产地为喜马拉雅山区、澳洲等各个地区。香水百合是百合中的女王，花语为“伟大纯洁的爱”，送的是心仪的女子，香水百合发展潜力巨大，市场前景广阔。

通过栽培试验比较，发现香水百合组培不仅能正常生长，而且在相同条件下栽培组培优于野生。因此，如何利用现代生物技术通过优化香水百合组织培养条件，为香水百合组织培养规模化生产育苗提供技术支撑，从而更好的开发和利用香水百合植物资源。

发明内容

本发明旨在提供一种香水百合组织培养快速繁殖方法。

本发明为实现上述目的，采取以下技术方案予以实现：

一种香水百合组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：

(1)外植体的取材与消毒：香水百合叶片作为外植体进行消毒，首先将3-5滴洗洁精滴入装有50ml自来水的烧杯中，把外植体放入烧杯轻轻搅拌5min，再用棉花清洗外植体表面污垢，自来水轻微流水冲洗20-30min；移置超净工作台，用75v/v％乙醇浸泡30s，无菌水冲洗一遍，然后再用添加了1-2滴吐温-20的50ml浓度为0.1v/v％升汞消毒1-2min、无菌水冲洗3-5次，获得无菌外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；

(2)无菌株的获取：将消毒好的外植体置于诱导培养基中进行不定芽诱导，发芽得到无菌株，所述诱导培养基是以1/2MS为基本培养基，添加5g·L^-1琼脂，20g·L-1蔗糖，1.5mg·L-1的6-苄基腺嘌呤，0.3mg·L-1的萘乙酸，培养基pH值为6.8，培养条件为：温度为25-27℃，光照强度1500-2000lux，光照时间为10-12h/d，培养时间为15-20d；

(3)脱分化及分化培养：切取2-3cm的无菌株置于添加5g·L-1琼脂，25g·L-1蔗糖，1.0-2.0mg·L-1的6-苄基腺嘌呤、0.1-0.5mg·L-1的激动素(KT)、0.1-0.5mg·L-1的萘乙酸、葡萄汁100-200g·L-1的1/2MS培养基中培养获得，培养基pH值为6.8，培养条件为：温度为25-27℃，光照强度1500-2000lux，光照时间为10-12h/d，培养时间为20d；

(4)炼苗移栽：进行炼苗后移植于基质中培养，先移栽至大棚7天，再移栽至大田。

优选的，步骤(4)中的炼苗移栽按以下操作进行：经过步骤(3)获得，在室温为20℃的室内进行炼苗，并在瓶中加水淹没培养基，炼苗5-7d，取出，洗净培养基，再放入ABT生根粉配成100mg/·L-1的溶液中浸泡30min,浸泡后移栽到基质中生长30-40d，再移栽至大田。

优选的，所述基质为按优质塘泥：黄沙＝2：1的比例混合。

与现有技术相比，本发明技术方案的有益效果是：