[发明专利]用于鼻咽癌诊断的标志物

说明书

本发明公开了一种用于鼻咽癌诊断的标志物，该组标志物包括TCRBV5.4、TCRBV6.3、TCRBV6.4、TCRBV6.6、TCRBV6.7、TCRBV7.9、TCRBV8.1、TCRBV10.2、TCRBV10.3、TCRBV12.3、TCRBV12.4、TCRBV15、TCRBV20.1、TCRBV22、TCRBV25.1，并通过LASSO模型构建了鼻咽癌诊断公式，得到了根据这些TCR基因预测鼻咽癌的方法，经过ROC检测，诊断公式在测试组中的AUC值达到0.96，当灵敏度为0.95时，特异性为0.86；在验证组中的AUC值为0.74，当灵敏度为0.79时，特异性为0.75，诊断效能良好。

技术领域

本发明涉及一种用于鼻咽癌诊断的标志物。

背景技术

鼻咽癌目前属于一种治愈率较高的疾病，关键在于早期诊断、及时治疗。因此，鼻咽癌的筛查和诊断尤为重要。然而由于鼻咽部解剖位置隐蔽，鼻咽癌早期症状不明显，给鼻咽癌早期诊断带来了一定困难。

目前鼻咽癌的主要辅助检查手段有电子鼻咽镜、鼻咽CT及EB病毒血清学检查等。电子鼻咽镜照明度强，图像清晰，可动态观察鼻咽全貌，能够发现鼻咽部微小隐蔽的病变，但是由于电子鼻咽镜不能发现粘膜下病变，故也存在一些假阴性。CT图像分辨率极高，较为经济实用，技能分辨骨质，也能分辨软组织，设备比较普及，是目前鼻咽癌诊断中常用的方法，但是，由于部分容积效应的影响，CT对于咽隐窝等隐蔽部位体积较小的早期病灶，尤其在等密度病灶时往往很难发现，同时，局部的验证、分泌物和淋巴组织是的在CT上判断鼻咽癌部的对称性变得困难。研究表明EB病毒与鼻咽癌的发生发展紧密相关，EB病毒血清学检查作为目前鼻咽癌诊断的辅助指标，在鼻咽癌上具有一定的指导意义，但是该方法存在一定的假阳性，不仅增加了临床的工作量，也给受检者带来不必要的压力。鼻咽癌诊断仍主要依赖于活检手术样本的病理诊断，亟需获得其他可有效辅助于鼻咽癌诊断的特异分子指标。

机体免疫系统识别和清除肿瘤细胞主要依赖于T细胞介导的细胞免疫。T细胞受体(TCR)是T细胞表面特异性识别抗原和介导免疫应答的分子，是人类基因组中多态性最高的区域之一，决定着人的免疫系统如何适应环境的变化。T细胞受体库的多样性(包括基因重组以及选择性表达)直接反映了机体免疫应答的状态。

TCR可分为TCRα/β和TCRγ/δ两种类型，人类外周血T细胞主要为TCRα/β的T细胞，是介导机体特异性细胞免疫反应的主要细胞。TCRβ基因由可变区(V)、多变区(D)、结合区(J)和恒定区(C)四部分基因片段组成，形成互补决定区(complementarities determiningregion,CDR)和间隔的4个骨架区(framework region,FR)。

在T细胞发育过程中CDR1，CDR2和FR区域相对保守，CDR3区由V、D和J进行重排而形成具有功能的TCR编码基因(T细胞克隆)，由于V(65种)、D(2种)、J(13种)基因片段本身具有多样性，此外，由于在重排的过程中，在VD及D-J的连接区经常有非模板的核苷酸的随机插入或删除，进一步增加了CDR3区的多样性(连接形成的多样性约为2×10¹¹)。这种基因片段连接的不准确性使TCR的表达呈多样性(即TCR库的多样性)，以识别各种不同的抗原。正常个体在无抗原刺激时，TCR基因重排是随机的，因此正常人外周T细胞呈多家族、多克隆性特点。在不同抗原(肿瘤、疫苗、病院微生物或者移植物等)刺激后，TCR V区基因可对该抗原产生特异性识别，并使带有这类基因的T细胞得到优势扩增，可用于分析不同TCR V亚家族T细胞的表达和利用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于鼻咽癌诊断的组合标志物，该组合标志物具有灵敏度高，特异性好的优点。

本发明所采取的技术方案是：