[发明专利]一种核苷三磷酸化合物的检测体系及其应用有效
| 申请号: | 201810424239.X | 申请日: | 2018-05-07 |
| 公开(公告)号: | CN108398397B | 公开(公告)日: | 2020-09-18 |
| 发明(设计)人: | 刘卫敏;丁颖;汪鹏飞;葛介超;贾庆岩;文咏梅 | 申请(专利权)人: | 中国科学院理化技术研究所;中国科学院大学 |
| 主分类号: | G01N21/33 | 分类号: | G01N21/33 |
| 代理公司: | 北京正理专利代理有限公司 11257 | 代理人: | 赵晓丹 |
| 地址: | 100190 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 核苷 磷酸 化合物 检测 体系 及其 应用 | ||
本发明公开一种核苷三磷酸化合物的检测体系及其应用。该检测体系包括用于产生1O2的正电碳点和带有硼酸基团的蒽衍生物的1O2捕获剂。本发明还公开了核苷三磷酸化合物检测体系在检测NTPs中的应用,通过本发明所述的方法可实现生物样品以及环境样品中NTPs的选择性检测和准确定量。
技术领域
本发明涉及生物检测领域。更具体地,涉及一种核苷三磷酸化合物的检测体系及其应用。
背景技术
核苷三磷酸化合物(NTPs)是构成生命体的重要组成部分,在生命的各项活动中发挥着不可替代的作用。这类化合物的化学结构中都含有一分子的葡萄糖、一分子含氮碱基以及三个带负电的磷酸根基团。根据碱基的不同,NTPs又分为腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)、胸腺嘧啶核苷三磷酸(TTP)、胞嘧啶核苷三磷酸(CTP)、尿嘧啶核苷三磷酸(UTP)和鸟嘌呤核苷三磷酸(GTP)。这类化合物参与机体内多项生命过程,例如,ATP是公认的机体“能量货币”,是机体内的各项活动的动力泵,同时是许多生物过程中的细胞信号传递介质,参与众多的生化反应;TTP参与DNA的复制和细胞的分裂;GTP参与RNA的合成,并且为蛋白质的合成提供能量;UTP参与许多酶促反应;CTP参与核酸的合成等。这类化合物的含量在一定程度上能够反映很多问题。例如ATP在正常细胞内的数量恒定,当机体内ATP的水平异常时,通常伴随着各种疾病;另外,ATP含量的高低常被作为微生物污染程度的重要指标。因此,实现对生物样品以及环境样品中NTPs的选择性检测和准确定量刻不容缓,对NTPs检测方法的研究具有重要意义。
目前用于检测NTPs的方法可以分为层析法,电泳法以及光学法。这些方法具有各自的优势与局限,例如在层析法中包括离子交换色谱法和高效液相色谱法等,这些方法灵敏度高,但所用仪器昂贵。
发明内容
本发明的一个目的在于提供一种核苷三磷酸化合物的检测体系,该检测体系对NTPs具有优良的选择性。
本发明的另一个目的在于提供一种核苷三磷酸化合物检测体系在检测NTPs中的应用,实现生物样品以及环境样品中NTPs的选择性检测和准确定量。
为达到上述目的,本发明采用下述技术方案:
第一方面,本发明提供一种核苷三磷酸化合物的检测体系,该体系包括用于产生1O2的正电碳点和1O2捕获剂,其中,所述1O2捕获剂为式I所示的带有硼酸基团的蒽衍生物:
其中,式I中R1、R4各自独立地选自氢、苯基、萘基、联苯基、1-6个碳原子的烷基或1-6个碳原子的烷基取代的苯基,R2、R3各自独立地选自氢或硼酸基团。
可选地,所述正电碳点与1O2捕获剂的质量之比为1:0.2至1:2.0。
可选地,核苷三磷酸化合物包括ATP、CTP、UTP、GTP或TTP。
第二方面,本发明提供一种核苷三磷酸化合物检测体系在检测NTPs中的应用。
可选地,本发明所述的核苷三磷酸化合物检测体系除了可检测环境样品中的NTPs,还可以检测生物样品,特别是血清样品中NTPs。
可选地,检测NTPs的方法包括以下步骤:
S1:配制正电碳点母液、1O2捕获剂母液以及待测样品母液;
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