[发明专利]miR-15a-5p在提高CAR-T细胞抗肿瘤能力中的应用

说明书

本发明公开了一种miR‑15a‑5p在提高CAR‑T细胞抗肿瘤能力中的应用，属于生物医学技术领域。本发明通过将Anti‑CD19 CAR载体与miRNA‑15a‑5p抑制剂共转T细胞，发现miRNA‑15a‑5p抑制剂能够提高CAR‑T细胞内的CD28的表达，使T细胞在免疫过程中快速增值、活化，提高抗肿瘤能力。因此，miRNA‑15a‑5p可以作为靶标用于筛选提高CAR‑T细胞抗肿瘤能力的药物，miRNA‑15a‑5p的抑制剂可用于制备提高CAR‑T细胞抗肿瘤能力的药物。本发明可以极大地提高CAR‑T细胞的抗肿瘤能力，为抗肿瘤药物的开发提供了新的方向。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体涉及一种miR-15a-5p在提高CAR-T细胞抗肿瘤能力中的应用。

背景技术

嵌合抗原受体T细胞(Chimeric Antigen Receptor T-Cell,CAR-T)是近年来新兴的免疫治疗技术，通过将靶细胞的特异性受体组装到T细胞上再输入病人体内，起到特异性肿瘤杀伤效果，取得不错的疗效。目前应用于临床的主要是第三代CAR-T，即在T细胞表面组装抗原受体的同时串联一些体细胞激活所需的共刺激分子，通常包括CD28和4-1BB，使嵌合在T细胞表明的抗原受体与靶抗原结合的同时激活共刺激分子使T细胞完全活。

CD28为T细胞表面B7类分子的受体，可以在T细胞增殖和分化中起到共刺激的作用，为T细胞完全活化提供条件，还与细胞周期、表过遗传修饰、代谢和翻译后修饰等有关。

发明内容

本发明的目的在于提供一种miR-15a-5p在提高CAR-T细胞抗肿瘤能力中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

本发明通过将Anti-CD19CAR载体与miRNA-15a-5p抑制剂antagomir(产品编号：miR30000068-1-10，广州市锐博生物科技有限公司)共转T细胞，发现miRNA-15a-5p抑制剂能够显著地提高T细胞内CD28的mRNA水平和蛋白质水平，以及细胞因子IFN-γ和IL-2的分泌水平，显著增强T细胞的细胞活性和杀瘤效果。这些结果表明miRNA-15a-5p抑制剂能够提高CAR-T细胞内的CD28的表达，使T细胞在免疫过程中快速增殖、活化，提高抗肿瘤能力。因此，miRNA-15a-5p可以作为靶标用于筛选提高CAR-T细胞抗肿瘤能力的药物。

miRNA-15a-5p的抑制剂可用于制备提高CAR-T细胞抗肿瘤能力的药物。

一种提高CAR-T细胞抗肿瘤能力的药物，包含miRNA-15a-5p的抑制剂。所述的药物还可以包含辅料，如赋形剂、载体等。

所述的miRNA-15a-5p的抑制剂包括针对miRNA-15a-5p的antagomir或siRNA，以及其他能够抑制miRNA-15a-5p活性的化学物质。

本发明具有如下优点和有益效果：本发明可以极大地提高CAR-T细胞的抗肿瘤能力，为抗肿瘤药物的开发提供了新的方向。

具体实施方式

以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例1

一、Anti-CD19CAR载体的构建

CAR的元件组成包括：引导链(leader)、抗CD19单链抗体(CD19-scFv)、铰链区(hinge)、CD28跨膜区(CD28TM)、CD28膜内区(CD28ICD)、4-1BB和CD3ζ链。各元件序列均为现有已知技术(Pub.NO.:US 2014/0271635A1)。