[发明专利]一种LC-MS/MS测定酱油中的尸胺的方法

说明书

本发明公开了一种LC‑MS/MS测定酱油中的尸胺的方法，采用多级反应监测，以离子对103.2＝＞86.1定量，离子对103.2＝＞69.1定性，酱油稀释后直接进样分析。本发明具有操作简单，检测成本低等特点，线性范围宽，回收率高的特点，具有很广的应用范围。

技术领域

本发明涉及一种食品成分分析领域，具体涉及一种酱油中尸胺检测方法。

背景技术

尸胺是生物胺的一种，尸胺是赖氨酸在脱羧酶的作用下脱羧的产物。在酱油发酵过程中，有大量的赖氨酸，在微生物的作用，酱油中会生成一些尸胺。因此，检测酱油中的尸胺十分重要。目前常用的方法是尸胺衍生化后用液相检测，但这种方法费时较长。本发明通稀释酱油样品后，采用多级反应监测(MRM)分析酱油中的尸胺含量。

发明内容

本发明的目的在于，克服了现有技术的前处理复杂的问题，提供了一种酱油中尸胺的鉴定方法。

本发明通过以下技术方案实现：

1色谱条件，流动相A：0.1％的甲酸水溶液；流动相B：0.1％的甲酸乙腈溶液。0min，5％B；5min，20％B。

2质谱条件：采用电喷雾离子源，气体温度300℃，流速8L/min，毛细管电压4000V，正离子模式。碎裂电压65，碎裂电压9，加速电压4，定量离子对103.2＝＞86.1；碎裂电压65，碎裂电压17，加速电压4，定性离子对103.2＝＞69.1。

3称取一定量色胺标准品，配制一定梯度的标准溶液，进行LC-MS/MS分析。

4.酱油样品稀释400-1000倍，直接进样分析。

5.积分保留时间为1.037min峰面积，确定校正曲线。带入样品的保留时间为1.037min峰面积，算出浓度×稀释倍数，即酱油的色胺含量。

附图说明

附图为实施例1中的拟合曲线。

具体实施方式：

下面通过具体实施例对本发明的技术方案做进一步说明：

实施例1

1色谱条件，流动相A：0.1％的甲酸水溶液；流动相B：0.1％的甲酸乙腈溶液。0min，5％B；5min，20％B，采用C3反相色谱柱。

2质谱条件：采用电喷雾离子源，气体温度300℃，流速8L/min，毛细管电压4000V，正离子模式。碎裂电压65，碰撞能量9，加速电压4，定量离子对103.2＝＞86.1；碎裂电压65，碰撞能量17，加速电压4，定性离子对103.2＝＞69.1。

3称取一定量腐胺标准品，配制6.9μg/L，34.6μg/L，173.2μg/L，86.6μg/L的标准溶液，进样量为5μL，进行LC-MS/MS分析。积分保留时间为1.037min峰面积，得到校正曲线y＝703.94x+12569，R²＝0.997其中y为峰面积，x为腐胺浓度。

4.酱油样品稀释1000倍，进样量为5μL。

5.带入样品的保留时间为1.037min峰面积22150，根据校正曲线，得x为18.6μg/L，算出浓度×稀释倍数，即酱油中色胺含量18.6mg/L。

本方法采用稀释法，消除了氯化钠对质谱的影响，稀释后直接进样避免了繁琐的前处理。线性范围宽1μg/L-900μg/L，加标回收在83％-96％之间。