[发明专利]一种GC-MS与触角电位仪联用分析昆虫信息化学物质的方法

说明书

本发明提出一种GC‑MS与触角电位仪联用分析昆虫信息化学物质的方法，属于化合物筛选测定技术领域，能够确保昆虫活性物质的筛选与样品物质成分的鉴定同步进行，实验步骤简化、快速高效，能够保障实验数据的一致性，且更经济实用。该技术方案包括将昆虫的触角沿基部剪下，去除顶端少许后，用导电胶将离体触角两端分别固定在触角电位仪的探头上，并与微电极相连；将样品进样到气相色谱仪中，进行气质‑触角电位仪联用分析；对气质联用色谱图和触角电位仪色谱图上相同保留时间出现的峰进行质谱检测，通过核对标准谱库与标准化合物的质谱图鉴定出具有活性的昆虫信息化学物质。本发明能够应用于昆虫对信息化学物质的感受机理、筛选活性信息素成分或植物次生物质等方面。

技术领域

本发明属于化合物筛选测定技术领域，尤其涉及一种GC-MS与触角电位仪联用分析昆虫信息化学物质的方法。

背景技术

随着我国经济的迅速发展，人们生活水平日益提高，尤其是对高品质日常饮食、生活环境等需求的不断提高，催生了绿色农业、有机农业的快速发展，而在农作物生产过程中不可避免的面临农业害虫的问题，因此，迫使人们去寻找防治害虫的绿色防控技术。利用昆虫信息化学物质来抑制害虫为害，既能降低害虫危害造成的损失，又能保护生态环境、保障农作物质量安全、促进农产品的整体提质增效，符合农业生产可持续发展的目标，因此，这方面的研究已成为昆虫化学生态方面的研究热点。

昆虫触角电位(EAG)和气相色谱-触角电位(GC-EAD)是昆虫化学生态学中最重要的电生理技术，在研究昆虫对信息化学物质的感受机理、筛选活性信息素成分或植物次生物质等方面发挥关键作用。触角电位是直接检测昆虫对化学信号物质反应的电生理技术，在信息素和挥发性植物次生物质的研究中，触角电位技术法可以鉴定昆虫对化学信号的感受通道，从一系列的化学物质中筛选出昆虫有生理反应的活性化合物，从而大大简化后续的研究工作。

EAG通常和GC一起使用，称为触角电位—气谱联用仪(GC-EAD)，其利用气相色谱能从复杂混合物中分离微量组分的优势，结合EAG的高度选择性，不必对每一部分化学成分都进行详细分析，仅考虑EAG有反应的物质，可以实现化学混合物的迅速筛选。GC-EAD在研究昆虫与信息化合物已有很多成功的案例，但在使用时需要搭配GC-MS，而在相同的色谱条件下，对生物活性成分进行定性，操作步骤繁琐，且两者的出峰时间会有差异。

发明内容

本发明提出一种GC-MS与触角电位仪联用分析昆虫信息化学物质的方法，该方法确保昆虫活性物质的筛选与样品物质成分的鉴定同步进行，实验步骤简化、快速高效，能够保障实验数据的一致性，经济实用。

为了达到上述目的，本发明提供了一种气质与触角电位仪联用分析昆虫信息化学物质的方法，包括以下步骤：

将昆虫的触角沿基部剪下，去除顶端少许后，用导电胶将离体触角两端分别固定在触角电位仪的探头上，并与微电极相连；

将样品进样到气相色谱仪中，进行气质-触角电位仪联用分析；

对气质联用色谱图和触角电位仪色谱图上相同保留时间出现的峰进行质谱检测，通过核对标准谱库与标准化合物的质谱图鉴定出具有活性的昆虫信息化学物质。

作为优选，所述气相色谱仪内加设两路微流分流器，一路连接质谱仪，另一路连接触角电位仪，其中，从气相色谱毛细柱末端分离的样品气流以设定比例分成两股气流，前者流入质谱仪中，后者经加热到适当温度后，汇入持续供应的清洁气流中流入触角电位仪中并吹向昆虫触角。

上述技术方案中通过调节连接至质谱仪和连接至触角电位仪的两个支路的长度，可实现气质色谱得到的波峰与EAG的波峰同时记录，并实现有效对应，这样可使收集的化学信息物质被迅速筛选，通过核对标准谱库与标准化合物的质谱图可被高效快速鉴定。需要说明的是，在针对不同昆虫物种检测不同信息化学物质时，所设定的气流比例可以是不同的，该气流比例可通过调节连接至质谱仪和连接至触角电位仪的两个支路的长度实现。