[发明专利]核酸提取方法在审
申请号: | 201810404724.0 | 申请日: | 2018-04-28 |
公开(公告)号: | CN108410859A | 公开(公告)日: | 2018-08-17 |
发明(设计)人: | 杨尚鑫;胡彬;刘杰;蔡媛媛;陶施芳 | 申请(专利权)人: | 绍兴迅敏康生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 杭州天昊专利代理事务所(特殊普通合伙) 33283 | 代理人: | 向庆宁;黄芳 |
地址: | 312071 浙江省绍兴市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸提取 裂解 核酸 前处理液 前处理 步骤简化 磁珠吸附 热裂解 磁珠 热裂 吸附 成功率 耗时 | ||
1.核酸提取方法,其特征在于:提取方法包括裂解步骤和转移步骤,裂解步骤完成核酸的热裂解和磁珠吸附热裂解释放的核酸,裂解步骤在裂解区域完成;将吸附有核酸的磁珠转移到前处理液中、完成转移步骤;前处理液位于前处理区域,裂解区域与前处理区域相互独立。
2.如权利要求1所述的核酸提取方法,其特征在于:裂解工位的容积为100~200微升;前处理工位的容积为100~200微升;裂解工位的容器和前处理工位的容器分别由独立的薄壁管组成。
3.如权利要求1所述的核酸提取方法,其特征在于:裂解区域由多个裂解工位组成,每个裂解工位具有容器的容纳腔;前处理区域由多个前处理工位组成,前处理工位承接磁棒和磁棒套从裂解工位转移的磁珠,裂解工位与前处理工位对应。
4.如权利要求3所述的核酸提取方法,其特征在于:加热负载包括传热板和所述容纳腔,容纳腔设于传热板,容纳腔由套筒围成。
5.如权利要求1所述的核酸提取方法,其特征在于:裂解区域和前处理区域位于操作空间内,在热裂解过程中,引导蒸汽和/或气溶胶排出操作空间;或者,裂解步骤中,升温完成后、制冷冷却裂解液。
6.如权利要求1所述的核酸提取方法,其特征在于:使用磁棒法将磁珠从裂解工位转移到前处理工位,每个前处理工位具有包裹容器的插孔,每个插孔位于磁场内;磁体设于插孔底部、或者侧面、或者磁体围绕管架。
7.如权利要求1所述的核酸提取方法,其特征在于:提取方法还具有封盖步骤,封盖步骤在转移步骤之后,封盖步骤对多个前处理工位同时封盖。
8.如权利要求7所述的核酸提取方法,其特征在于:封盖步骤的每个管盖对应一个前处理单元,管盖上具有与薄壁管一一对应的密封部;封盖时,密封部先部分预压入对应的薄壁管,预入定位后、再将所有密封部同时压入薄壁管。
9.如权利要求1所述的核酸提取方法,其特征在于:封盖前、将管盖从管盖架上取出、转移并对准相应的前处理单元,管盖架定位管盖。
10.如权利要求1所述的核酸提取方法,其特征在于:磁珠转移到前处理液中,磁棒从磁棒套撤离,磁棒静置于前处理液,静置后磁棒套沿轴向振动;或者,磁棒是永磁体或者电磁体,磁棒是电磁体时,电磁体在从磁棒套撤离时失磁;或者,在磁棒撤离PCR反应管前,带有磁棒的磁棒套缓慢的从上下运动,磁棒套运动的上限位置为磁棒套底部到达PCR反应管的液面,磁棒套运动的下限位置为磁棒套不触碰PCR反应管的最低位置;磁棒套与PCR反应管间隙配合,磁棒套在PCR反应管中的液体区域内上下平移,或者,磁棒套与PCR反应管的管壁有距离,磁棒套在PCR反应管的液体区域内既做上下平移、也做左右平移或画圈式移动。
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