[发明专利]一种产香放线菌菌株及其应用

说明书

本发明公开了一种产香放线菌菌株，所述菌株为链霉菌（Streptomyces sp.）SYSUZL‑4，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2017年11月02日，保藏号为CGMCC NO：14848。该放线菌能够合成榄香烯、土味素、榄香醇、β‑桉叶醇、α‑桉叶醇等挥发性物质，在香精香料的生产上具有较大的开发潜力，可用于制备烟用香料，应用于烟草领域。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及从香茅草根际土壤中分离获得的一种产香放线菌菌株及其应用。

背景技术

香茅草(Cymbopogon citratus)为多年生草本，是生长在亚热带的一种重要香料作物，本身具有较高的开发价值，但植物香料具有资源有限、栽培时间长、受季节气候限制等缺点，目前仅依靠植物的香料开发已不能满足香料行业的需求。近年来，越来越多的研究者开始关注与产香植物相关的产香微生物的开发，以期找到新的天然香料资源。微生物香料较其他香料具有香气自然柔和、生产周期短、产量收获高、成本低、工艺简单等优点，在微生物代谢过程中产生的复杂低分子化合物，包括醇类、醛类、酯类、萜烯类等香气物质，为天然香料生产提供了一个新的来源，但目前从根际土壤中分离获得产香微生物的报道很少。

榄香醇为一种倍半萜烯，可用作香精原料。桉叶醇包括α-桉叶醇和β-桉叶醇，广泛存在于许多桉树的油中，可用作定香剂，其乙酸酯在澳大利亚作佛手柑油的代用品。迄今能够合成榄香醇、β-桉叶醇、α-桉叶醇等香味物质的微生物仍少有报道。目前，卷烟“降焦减害”已成为全球烟草发展的方向，而“降焦减害”往往会导致烟草产品香气不足、品质降低，利用新型烟用香原料提升烟草品质一直是烟草企业和香料公司香料研究的热点。近年来，国内烟用香精香料技术已取得一些进展，但仍无法满足我国中式低焦油卷烟的发展需要，且香料品质较为单一，因此大力开展新型烟用香料的开发和应用研究，将成为中式低焦油卷烟增香提味的一项重要举措。利用微生物发酵制备生物香料，对于提高烟草的吸食品质具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一株能产生挥发性香味物质的放线菌菌株及其应用，该放线菌菌株来源于香茅草根际土壤，易于培养，在改良T5固体培养基上生长3-4天则能嗅闻到浓郁怡人的香气。

为了是实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供了一种产香放线菌菌株，该菌株结合形态特征和基于细菌16S rRNA基因序列的系统发育分析，鉴定为链霉菌(Streptomyces sp.)SYSUZL-4，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2017年11月02日，保藏号为CGMCC NO：14848。

将香茅草根际土壤样品进行常规稀释，取10^-3的稀释悬浮液涂布分离培养基，涂布后于28℃培养，待菌落长出后结合划线分离法在固体平板上进行分离纯化，直至获得纯培养。将分离获得的纯培养菌株转接至含有简单碳氮源的改良T5固体培养基平板进行培养，用封口胶将培养皿封口，培养至72h，通过嗅闻培养皿气味进行初筛，并综合发酵液气味特征和香气强度进行复筛，进而获得产香效果最好的菌株SYSUZL-4。

其中，改良T5固体培养基成分为：每1000mL培养基中，葡萄糖5.0g，胰蛋白胨0.5g，酵母粉2g，碳酸钙2g，微量盐1.0mL，琼脂16g，PH 7.2。

微量盐成分为:CuSO₄·5H₂O 6.4g，FeSO₄·7H₂O 1.1g，MnCl₂·4H₂O 7.9g，ZnSO4·7H2O 1.5g，超纯水定容至1000mL。