[发明专利]利用间歇浸没生物反应器进行中药材地黄组织培养扩繁方法

权利要求书

1.利用间歇浸没生物反应器进行中药材地黄组织培养扩繁方法，其特征在于具体过程为：

（1）按照配方基本培养液MS+激素NAA 0.01-0.05mg/L+激素6-BA 0.1-0.5mg/L+蔗糖30g/L，调整pH值5.8-6.2配制培养液，将配制的培养液高温高压湿热灭菌后备用，再将间歇浸没生物反应器包扎，高温高压湿热灭菌后备用；

（2）在无菌环境中，将已灭菌的培养液倒入已灭菌的间歇浸没生物反应器中，再将怀地黄无菌组培苗除去叶面，取怀地黄带腋芽茎段直接接种于间歇浸没生物反应器中，其中怀地黄带腋芽茎段的接种密度为20-50个/L；

（3）设定间歇浸没生物反应器的参数为浸没频率3-15min/6-12h，培养时间为35-60d，设定培养环境条件为光照强度1500-1800lux，光照12h/d，温度25±1℃。

2.根据权利要求1所述的利用间歇浸没生物反应器进行中药材地黄组织培养扩繁方法，其特征在于：所述间歇浸没生物反应器中怀地黄带腋芽茎段的接种密度为40个/L。

3.根据权利要求1所述的利用间歇浸没生物反应器进行中药材地黄组织培养扩繁方法，其特征在于：所述间歇浸没生物反应器的设定参数为浸没频率5-10min/6-10h。

4.根据权利要求1所述的利用间歇浸没生物反应器进行中药材地黄组织培养扩繁方法，其特征在于具体步骤为：

（1）按照配方基本培养液MS+激素NAA 0.02mg/L+激素6-BA 0.2mg/L+蔗糖30g/L，调整pH值5.8配制培养液，将配制的培养液高温高压湿热灭菌后备用，再将间歇浸没生物反应器包扎，高温高压湿热灭菌后备用；

（2）在无菌环境中，将已灭菌的培养液倒入已灭菌的间歇浸没生物反应器中，再将怀地黄无菌组培苗除去叶面，取怀地黄带腋芽茎段直接接种于间歇浸没生物反应器中，其中怀地黄带腋芽茎段的接种密度为40个/L；

（3）设定间歇浸没生物反应器的参数为浸没频率5min/6h，培养时间为60d，设定培养环境条件为光照强度1500-1800lux，光照12h/d，温度25±1℃，最终怀地黄培养增殖系数为7.75，将组培苗移栽后，植株的成活率达到90%以上且植株生长健康。