[发明专利]一种柑橘专性AM接种剂及其制备方法

说明书

本发明涉及农业种植技术领域，尤其涉及一种柑橘专性AM接种剂及其制备方法。本发明通过将分离获得的柑橘专性AM真菌按照1：800‑1000的比例与无菌土混合，并在其中进行柑橘砧木育苗12‑16周，使柑橘专性AM真菌得到充分的扩繁并且与柑橘砧木根系充分共生，然后将柑橘砧木根系及其培养土粉碎后包装得到。本发明通过严格控制柑橘专性AM真菌与无菌土混合的比例，且控制柑橘砧木育苗的时间，最终得到了一种AM真菌含量高，接种活性好，并且其中根外菌丝体、孢子、根内菌丝体、内生AM菌根菌比例较为适宜的柑橘专性AM真菌接种剂。

技术领域

本发明涉及农业种植技术领域，尤其涉及一种柑橘专性AM接种剂及其制备方法。

背景技术

AM真菌，即丛枝菌根真菌，是农业生态系统中一类重要的土壤微生物，对作物具有促进生长发育、改善营养吸收、提高抗病性和抗逆性等诸多有益作用。

丛枝菌根，1885年，德国植物生理学和森林学家Frank首创“菌根”(Fungus-root即Mycorrhiza)这一术语。菌根是自然界中一种普遍的植物共生现象,它是土壤中的菌根真菌菌丝与高等植物营养根系形成的一种联合体。共生真菌从植物体内获取必要的碳水化合物及其他营养物质，而植物也从真菌那里得到所需的营养及水分等，从而达到一种互利互助、互通有无的高度统一。它既具有一般植物根系的特征，又具有专性真菌的特性。

目前，国外已有相关的接种剂出售，其商品制剂的工厂化生产技术已趋于成熟，但因其价格昂贵，运输不便及在实际使用中存在的诸多问题，导致高质量的AM接种剂还相对较少。目前，国内也开始有相关企业涉足本领域，但其产品质量参差不齐，而且产量小，购买后仍需进一步扩繁。总体而言，国内在AM真菌接种剂的工厂化、商业化生产方面仍然处在起步阶段，加之AM真菌不能离开宿主植物进行单独培养，因此实现AM真菌接种剂的大规模商业化生产仍较为困难。

现阶段对AM真菌接种剂的生产工艺进行了多种改进，如专利CN02159722.7公开了一种生产丛枝菌根真菌菌剂的方法，在由草碳15～25份，蛭石15～20份，珍珠岩30～45份，沸石15～25(重量)份组成的培养基质上，接种相当于基质体积5～10％的含有丛枝菌根真菌的繁殖体的菌剂，采用多种寄主植物混播混作方式进行培养；每2～3天浇一次营养液；培养17～18周后，收集培养基质和植物根系即成；如专利申请CN201511023372.7，公开了一种丛枝菌根真菌菌剂，按照以下步骤制备得到：以白车轴草种子和麦冬种子作为宿主植物，以摩西球囊霉、网状球囊霉、幼套球囊霉或根内球囊霉为接种剂，在特定营养条件下进行培养，将生长至收获期的植株的根部以上部位去除，剩余根系及基质部分粉碎混匀，即得丛枝菌根真菌菌剂，此两种菌剂均含有各种AM真菌，用于柑橘种植时有效的柑橘专性丛枝菌根真菌含量较少，效果较差。因此，寻找一种柑橘专性AM接种剂是目前急需解决的问题。

发明内容

为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明提供一种柑橘专性AM接种剂及其制备方法，具体是通过以下技术方案得以实现的：

(1)将无菌柑橘砧木种子经过无菌温水清洗后，再用无菌温水浸泡0.5-4h，用65-85％酒精漂洗晾干；

(2)将柑橘专性AM真菌按照1：800-1000的比例与无菌土混合，在其中培育晾干的柑橘砧木种子，进行柑橘砧木育苗，使柑橘专性AM真菌得到充分的扩繁并且与柑橘砧木根系充分共生；

(3)柑橘砧木育苗12-16周，最后将柑橘砧木根系及其培养土经过粉碎处理，使土壤中的AM根外菌丝体、孢子等繁殖体；柑橘砧木根系中的根内菌丝体、内生AM菌根菌，混合均匀后包装，即得柑橘专性AM真菌接种剂；

(4)控制柑橘专性AM真菌接种剂水分含量15-45％，包装，即得。

所述柑橘砧木种子是枳、枳橙的种子。