[发明专利]一种斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1及其应用

说明书

本发明公开了一种斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1，它的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。还公开了该斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1的编码蛋白，它的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。并进一步公开了包含该斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1的表达载体，一种斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1重组蛋白的制备方法及该方法获得的重组蛋白，以及该重组蛋白在制备具有促进摄食功效的鱼类促食剂和鱼类饲料添加剂中的应用。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1及其应用。

背景技术

刺鼠相关蛋白(Agouti-related protein，AGRP)是由AgRP基因所编码，由下丘脑AgRP/NPY神经元产生的一种旁信号分子，又称之为刺鼠相关肽。AGRP与NPY在同一类神经元中共表达，起到了增加食欲、减少新陈代谢和能量消耗的作用。同时，AGRP是一种强效和长效的食欲刺激物质，在小鼠中单次注射后促进摄食的效应时间能达到7天以上。人和大鼠的AGRP均由132个氨基酸构成，而且具有非常高的保守型(81％)。研究结果显示AGRP的二级结构主要由自由螺旋和β-片层构成，其对于受热变性和酸降解具有很高的稳定性。核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance，NMR)研究结果显示，AGRP末端结构由多个保守的半胱氨酸残基组成的5对二硫键维系，多个研究显示该结构是其发挥生理功能的重要区域。

AgRP基因主要在下丘脑和肾上腺高表达，在性腺、肾脏和肺低表达，储存在细胞内的分泌颗粒通过调节通路进行分泌。在小鼠中通过转基因过表达AGRP会造成食欲过盛，从而出现肥胖和高血糖的症状，揭示了AGRP在摄食和能量消耗调控方面的重要作用。在中枢神经系统，AGRP主要通过对黑皮质素受体(特别是MC3R和MC4R)的抑制作用而刺激食欲上升。虽然AGRP抑制黑皮质素受体信号的确切机制尚不清楚，但根据目前的研究结果，AGRP主要具有两种功能：抑制α-MSH与黑皮质素受体的结合的竞争性拮抗剂(competitiveantagonist)功能和直接抑制黑皮质素受体活性的反向激动剂(inverse agonist)功能。在外周组织中，AGRP主要在肾上腺表达。大鼠在饥饿状态下，肾上腺皮质AGRP短型异构体上调，同时下丘脑AGRP短型异构体也上调。肥胖人群和禁食大鼠体内血浆中AGRP水平也会上调。正因为如此，AGRP在摄食和能量代谢中的作用目前已被大多数的学者所肯定。

AGRP还能够通过调节下丘脑-垂体轴从而影响神经内分泌的功能。在大鼠中，脑腔注射AGRP会导致促甲状腺激素(TSH)以及血液循环中的T3、T4两种甲状腺激素水平的下降，从而使甲状腺功能受到抑制。尽管NPY对生殖的调控已被证实，但是有关其同源性物质AGRP及其递质，比如由AgRP神经元产生的GABA，对生殖方面的影响的信息很少，目前国外很多学者研究认为，AGRP通过下丘脑黑皮质素系统在生殖系统的调控过程中发挥了一定的作用。

斜带石斑鱼俗称青斑，是一种鲈形目鮨科鱼类，由于其具有肉质鲜美、营养丰富、抗逆性强、生长快速等特点，近年来已经成为福建、广东、海南、台湾四省重要的海水养殖鱼类。在水产养殖领域，利用AGRP强效和长效的食欲刺激效果，能够从内分泌水平提高养殖鱼类摄食量，促进其生长，从而达到缩短养殖周期和降低养殖成本的目的。

发明内容

本发明的目的之一是提供斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1及其编码蛋白、含有所述斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1的表达载体。

本发明的目的还在于提供一种斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1重组蛋白的制备方法以及由该方法制备获得的斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1重组蛋白。

本发明的第三个目的在于提供上述斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1重组蛋白在制备具有促进摄食功效的鱼类促食剂和鱼类饲料添加剂中的应用。

本发明的上述第一个目的是通过以下技术方案来实现的：斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1，它的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。