[发明专利]采用大孔树脂对南瓜低聚糖的精制方法

说明书

本发明公开了一种采用大孔树脂对南瓜低聚糖进行精制的方法，步骤包括：将南瓜低聚糖粗提物加水配成南瓜低聚糖上柱溶液，通过装有大孔树脂的层析柱进行吸附，收集流出液；静置，用去离子水淋洗大孔树脂，蒸发浓缩、冻干，得到无色南瓜低聚糖；使用乙醇溶液洗，采用乙醇浸泡，NaOH溶液通过树脂柱并浸泡，水洗至中性；采用盐酸通过树脂柱并浸泡，回收大孔树脂；旋蒸蒸发和冷冻干燥，回收有色杂质和乙醇。该精制方法在达到南瓜低聚糖高效脱色的同时，可同时去除单糖和蛋白质杂质，所得南瓜低聚糖的纯度高达95～96％；而且该工艺处理条件温和，不要高温或酸碱处理，不用引起南瓜低聚糖的降解，所得有色杂质类黑精可以回收利用。

技术领域

本发明属于南瓜低聚糖的纯化技术领域，具体涉及一种采用大孔树脂对南瓜低聚糖的精制方法。

背景技术

大量研究已经证实南瓜中的多糖、低聚糖等功能性糖成分具有血糖调节功能，且该功能性糖作为一种天然植物来源的成分，安全性也受到广泛的认可。低聚糖(oligosaccharide)又可称为寡糖，是由2-10个单糖通过糖苷键连接成直链或支链的低度聚合糖，分子量在200～3000D之间。由于单糖分子结合位置和结合类型不同，形成了种类丰富的低聚糖。低聚糖有良好的功能特性，可作为甜味来源，但不被人体胃酸、胃酶降解，不在小肠吸收，进入大肠后选择性促进有益菌的增殖并抑制病原菌和腹泻，还有保护肝脏、降低血清胆固醇、抗龋齿等功能。低聚糖因其独特的功能特性备受关注，未来在功能食品、饲料和添加剂等领域有很好的研究价值和应用潜力。

目前，多采用水提醇沉法制备南瓜多糖，分离过程中大分子多糖沉淀后上清液中仍含大量的碳水化合物，推测为分子量较低的低聚糖。一般采用膜过滤法有效分离上清液中的南瓜低聚糖粗品，然而产品呈深棕褐色，是由南瓜中的色素及加工过程中产生的有色杂质引起，对南瓜低聚糖纯化、结构研究及工业化应用造成障碍。

目前在食品工业中常见的脱色方法有，如有机溶剂脱色法、活性炭脱色法、活性炭吸附脱色法，双氧水脱色法。然而，这些方法应用于南瓜低聚糖脱色时存在脱色效率低、破坏低聚糖结构如双氧水氧化破坏糖链、运营成本高及回收困难等问题。因此，研究一种高效、环保的南瓜低聚糖脱色、除杂方法具有重要意义。

大孔树脂是近几年发展起来的一类有机高分子吸附剂，是用于天然提取物脱色的有效方法。与传统脱色方法相比，大孔树脂脱色法具有操作简单，分离效率高，易于回收，成本低和污染小等特点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种采用大孔树脂对南瓜低聚糖的精制方法，从而克服现有南瓜低聚糖中有色物质脱色效果差、杂质去除率低、破坏低聚糖结构的缺点。

为实现上述一个或多个目的，在本发明的一个实施方案中，本发明提供了一种采用大孔树脂对南瓜低聚糖的精制方法，包括如下步骤：

(1)将南瓜低聚糖粗提物加水，配成南瓜低聚糖上柱溶液；将0.8～1.5倍柱体积(BV)所述南瓜低聚糖上柱溶液通过装有大孔树脂的层析柱，进行上柱吸附，然后收集流出液；

(2)静置，然后用去离子水淋洗大孔树脂，将柱中剩余的南瓜低聚糖洗脱液与步骤(1)中所得流出液合并，然后蒸发浓缩、冻干，得到无色南瓜低聚糖；

(3)使用1.5～2.2BV的乙醇溶液洗脱吸附大孔树脂上的有色杂质；采用乙醇浸泡，用水洗至无醇味，采用NaOH溶液通过树脂柱并浸泡，水洗至中性；然后采用盐酸通过树脂柱并浸泡，水洗至中性，回收大孔树脂；最后，经旋蒸蒸发和冷冻干燥，回收有色杂质和乙醇。

上述精制方法中，通过大孔树脂可以去除南瓜低聚糖粗提物中的部分单糖和蛋白质。具体去除原理是：依靠大孔树脂的分子筛作用，使得分子量不同的低聚糖和单糖得以分离；再根据蛋白质和糖本身的结构和物理、化学性质不同，导致南瓜低聚糖粗提物中的蛋白质和低聚糖在大孔树脂上的吸附、洗脱性能不同，使得部分蛋白质得以去除；总之，通过大孔吸附树脂最终除去了南瓜低聚糖中的部分单糖和蛋白质。