[发明专利]沙棘组培快繁与植株再生方法

说明书

本发明提供沙棘组培快繁与植株再生方法，包括以下步骤：(1)选择材料：以嫩茎尖作为组培育苗材料；(2)对材料进行消毒；(3)茎尖的诱导；(4)茎尖的增殖；(5)茎尖的生根；(6)移栽：在生根培养基中诱导生根35‑50天后成苗移栽，移入基质中进行培养，移苗后的第一周将湿度控制在95％以上，逐渐延长通风和光照时间，13‑15d才能完全自然通风；同时要控制好温度，白天温度控制在25±2℃，夜间控制在16‑18℃；待苗高50cm以上时，移栽至大田。本发明的沙棘组培快繁与植株再生方法能够有效提高沙棘嫩茎尖在组培过程中的诱导率、增殖率及生根率，移栽后，成活率也达到95％以上。

技术领域

本发明属于通过组织培养技术的植物再生技术领域，具体涉及沙棘组培快繁与植株再生方法。

背景技术

沙棘(拉丁学名：Hippophae rhamnoides Linn.)为多年生落叶果树，灌木或小乔木。其果实、果皮、叶片、树皮及其加工制品含有280多种生理活性物质，具有强烈的消炎、杀菌、止痛和促进组织再生的特殊功效。其中许多成分在杀死和抑制肿瘤细胞、抗辐射、抗凝血、降血压、防止血管栓塞、抗衰老、抗疲劳、增强机体活力和免疫力等方面都显示出神奇的治疗效果。

沙棘枝叶茂盛、侧根发达、根蘖性极强，能迅速串根自蘖形成密集的群体，并能与放线菌、细菌、分枝杆菌等共生形成大量根瘤，具有比大豆更强的固氮能力(每公顷可固氮180kg)。此外，具有生长迅速，耐干旱，耐盐碱瘠薄，御严寒酷暑，具有保持水土、防风固沙、改良土壤和适应性强等促进生态平衡的明显作用，不仅是干旱风沙地区造林绿化的先锋树种，也是重要的薪炭林和饲料林树种。所以，在当前的退耕还林、农林产业结构调整中，种植沙棘具有重要的营养价值、生态价值和经济价值。

沙棘雌雄异株，靠种子繁殖在生产上难以保持优良品种的特性；根蘖繁殖繁殖系数较低。目前生产上采用的扦插繁殖成活率也不高，还容易传播病害。利用组织培养方法工厂化的繁育种苗不仅能大大提高繁殖系数，还可以建立离体无性种质资源库，替代占用大量土地面积的资源圃。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了沙棘组培快繁与植株再生方法。

本发明提供沙棘组培快繁与植株再生方法，包括以下步骤：

(1)选择材料：以嫩茎尖作为组培育苗材料；

(2)对材料进行消毒；

(3)茎尖的诱导：将消毒后的嫩茎尖的基部叶片剥离，接种于诱导培养基中进行培养；

(4)茎尖的增殖：将嫩茎尖在诱导培养基中诱导24-28天后转入增殖培养基中进行增殖培养；

(5)茎尖的生根：将增殖培养获得的丛生苗单株切下，接种到生根培养基中进行诱导生根；

(6)移栽：在生根培养基中诱导生根35-50天后成苗移栽，移入基质中进行培养，移苗后的第一周将湿度控制在95％以上，逐渐延长通风和光照时间，13-15d才能完全自然通风；同时要控制好温度，白天温度控制在25±2℃，夜间控制在16-18℃；待苗高50cm以上时，移栽至大田。

作为优选，步骤(2)中，所述消毒的具体方法为：取嫩茎尖，剥除外围叶片，先用自来水清洗干净，流动自来水清洗9-13min，蒸馏水冲洗2-3遍，然后置入已预灭菌30-40min的超净工作台上，接着用0.1％的HgCl₂消毒2-3min，期间不断震摇，最后用灭菌蒸馏水冲洗6-7次。

作为优选，步骤(3)中，所述诱导培养基的配方为：1/2MS+6-BA 0.2-0.4mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L。

作为优选，步骤(3)中，所述诱导培养时的培养条件为：温度25±1℃，湿度50％-60％，光照强度2000-2500Lx，光照时间13-15h/d。