[发明专利]检测(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷中对映异构体含量的方法

权利要求书

1.一种检测(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷中对映异构体含量的方法，其特征在于：步骤如下：

(1)色谱条件：

色谱柱：CHIRALPAK AD-H手性柱，250×4.6mm，粒径5μm；

检测波长：246nm；

流动相：正己烷与无水乙醇的混合液；

流速：1.0～1.5ml/min；

柱温：20～40℃

运行时间：至少25min；

(2)衍生化：

称取(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷，置于反应瓶中，加入溶剂和1-二甲氨基萘-5-磺酰氯，20～30℃下搅拌0.5-1小时，得到(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷衍生物溶液；

称取(R,R)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷，置于反应瓶中，加入溶剂和1-二甲氨基萘-5-磺酰氯，20～30℃下搅拌0.5-1小时，得到(R,R)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷衍生物溶液；

(3)供试品溶液的配制：

精密量取(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷衍生物溶液，置容量瓶中，加入无水乙醇稀释至刻度，作为供试品溶液；

(4)对映异构体溶液的配制：

精密量取(R,R)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷衍生物溶液，置容量瓶中，加入无水乙醇稀释至刻度，作为对映异构体溶液；

(5)空白溶液的配制：

不加(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷及(R,R)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷，采用步骤(2)所述方法衍生化，精密量取，置容量瓶中，加入无水乙醇稀释至刻度，作为空白溶液；

(6)系统适用性溶液的配制：

精密量取对映异构体溶液，置容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，作为系统适用性溶液；

(7)检测方法：

取空白溶液10μl注入液相色谱仪，记录图谱；取对映异构体溶液10μl注入液相色谱仪，记录图谱；取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录图谱，记录峰面积，计算(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷中对映异构体的含量；

其中：

步骤(2)中，所述的溶剂为二氯甲烷；

步骤(2)中，所述的1-二甲氨基萘-5-磺酰氯的用量为(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷或(R,R)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷的物质的量的1.0～1.2倍。

2.根据权利要求1所述的检测(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷中对映异构体含量的方法，其特征在于：所述的正己烷与无水乙醇的混合液，正己烷与无水乙醇的体积比为45～75:25～55。

3.根据权利要求2所述的检测(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷中对映异构体含量的方法，其特征在于：所述的正己烷与无水乙醇的混合液，正己烷与无水乙醇的体积比为55:45。

4.根据权利要求1所述的检测(S,S)-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷中对映异构体含量的方法，其特征在于：所述的柱温为25～35℃。