[发明专利]红细胞处理方法及其应用

说明书

本发明提供了一种处理红细胞的方法，包括收集红细胞并依次以含菠萝酶的生理盐水溶液和含戊二醛的生理盐水溶液接触所述红细胞。本发明还提供了包含所述红细胞的可溶解膜、试剂卡以及利用所述红细胞来进行血型鉴定的方法。经本发明方法处理的的红细胞保质期长、易运输，并可以直接或者以可溶解膜的形式预先保存在试剂卡的反应腔内，在加入待检血清或血浆后方便地获得检测结果，首次实现了反定测试预先加入反定细胞的操作。

技术领域

本发明涉及处理红细胞的方法及其应用，属于生物技术和医学领域。

背景技术

ABO血型是由细胞表面抗原和血液中抗体两者决定的，正反定型都进行检测才能正确地判定血型。为了增加ABO正定型的可靠程度，在进行正定测试的同时需要进行反定型测试，即用已知血型标准红细胞作为试剂检测待测血清或血浆中的血型抗体。这就涉及到红细胞试剂的保存问题。通常红细胞试剂处于红细胞保存液中，维持在2-8℃，在运输中需要全程冷链。红细胞试剂容易受外界温度的影响发生溶血，比如，运输过程中，温度过高会显著降低细胞寿命，细胞直接接触用于温控的冰块则会造成细胞溶血。另外，运输中过度颠簸同样会造成细胞溶血而降低细胞寿命，因此试剂红细胞的有效期通常只有2至3个月。

另外，关于血型检验的反定测试，目前在工业界还没有方法能够实现红细胞预先加入反应体系，都需要在测试前临时取用保存的红细胞试剂，这增加了操作的复杂性。

发明内容

为了克服上述问题，在一方面，本发明提供了一种处理红细胞的方法，其包括收集红细胞并依次以含菠萝酶的生理盐水溶液和含戊二醛的生理盐水溶液接触所述红细胞。

在一个实施方案中，所述含菠萝酶的生理盐水溶液中菠萝酶的含量为0.1mg/ml至10mg/ml。

在一个实施方案中，所述接触包括让所述红细胞与所述含菠萝酶的生理盐水溶液一起于37℃孵育30min。

在一个实施方案中，所述含戊二醛的生理盐水溶液中戊二醛的含量以重量计为0.03％至1％。

在一个实施方案中，所述接触包括让所述红细胞与所述含戊二醛的生理盐水溶液一起室温孵育1小时或4℃孵育过夜。

在一个实施方案中，所述红细胞为人A型红细胞、人B型红细胞、人AB型红细胞或人O型红细胞。

另一方面，本发明提供了经上述方法处理而获得的红细胞。

另一方面，本发明提供了一种含有红细胞的可溶解膜，其通过如下步骤制备：

1)将上述经处理的红细胞加入水溶性高分子成膜材料的溶液中，混匀；以及

2)让步骤1)得到的混合物形成固态膜状物。

在一些实施方案中，所述水溶性高分子成膜材料选自PVA、PVP/PVA复合物、PAA、以及壳聚糖。在优选的实施方案中，PVP/PVA复合物中PVP与PVA的重量比可以为7:3、6:4、5:5或4:6。

在一些实施方案中，步骤2)通过使用吹塑法、流延法或静电纺丝法让所述混合物形成固态膜状物。

在一些实施方案中，所述可溶解膜的厚度为10μm至1mm。

另一方面，本发明提供了一种进行ABO血型反定型的方法，包括让待检血清或血浆与经本发明方法处理的红细胞接触或者与所述可溶解膜接触。

另一方面，本发明提供了一种ABO血型反定型试剂卡，所述试剂卡的一个或多个反应腔内包括经本发明方法处理的红细胞或所述可溶解膜。

经本发明方法处理的的红细胞保质期长、易运输，并可以直接或者以可溶解膜的形式预先保存在试剂卡的反应腔内，在加入待检血清或血浆后方便地获得检测结果，减化了反定测试的操作。

附图说明