[发明专利]一种木麻黄愈伤组织再生体系的建立方法有效
| 申请号： | 201810385101.3 | 申请日： | 2018-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN108703069B | 公开（公告）日： | 2019-09-10 |
| 发明（设计）人： | 崔富强;张炎;金继祖;柳参奎;焦西;王顺斌;陈吉鹏;陈娇羽;杨海芸;曹友志 | 申请（专利权）人： | 浙江农林大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 311300 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 木麻黄 愈伤组织 再生体系 愈伤组织诱导培养基 膨大 茎段 培养基 蔗糖 诱导愈伤组织 愈伤组织诱导 诱导培养基 幼嫩枝条 不定芽 实生苗 外植体 再生苗 生根 | ||
1.一种木麻黄愈伤组织再生体系的建立方法，其特征在于，包括：
(1)取木麻黄实生苗的幼嫩枝条作为外植体，清洗消毒后，切成小段，接至外植体膨大诱导培养基上进行培养，得到膨大的茎段；所述外植体膨大诱导培养基为：1/2MS+3％蔗糖+0.1mg/L TDZ+0.1mg/L NAA，pH5.7±0.1；
(2)取所述膨大的茎段，移至愈伤组织诱导培养基上进行培养，得到愈伤组织；所述愈伤组织诱导培养基为：1/2MS+3％蔗糖+0.5mg/L6-BA+0.1mg/L TDZ，pH5.7±0.1；
(3)将所述愈伤组织移至不定芽诱导培养基中进行培养，得到含有不定芽的愈伤组织；
(4)将所述不定芽移至生根培养基中进行培养，炼苗后，得到木麻黄再生苗。
2.如权利要求1所述的建立方法，其特征在于，步骤(1)中，所述幼嫩枝条为30-90日龄的实生苗根部1cm以上的枝条。
3.如权利要求1所述的建立方法，其特征在于，步骤(1)中，所述清洗消毒的方法为：流水冲洗2-3h后，用75％的酒精消毒30s，再用无菌水冲洗3次后，用2％的次氯酸钠消毒4～6min，最后用无菌水冲洗5次。
4.如权利要求1所述的建立方法，其特征在于，步骤(1)中，膨大诱导培养的条件为：28℃下暗培养7-10d。
5.如权利要求1所述的建立方法，其特征在于，步骤(2)中，愈伤组织诱导培养的条件为：28℃下暗培养7-13d。
6.如权利要求1所述的建立方法，其特征在于，步骤(3)中，所述不定芽诱导培养基为：1/2MS+3％蔗糖+0.5mg/L 6-BA，pH5.7±0.1。
7.如权利要求1所述的建立方法，其特征在于，步骤(3)中，不定芽诱导培养10～15d后，继代一次，再培养45～60d；不定芽诱导培养的条件为：每天28℃下光照培养16h，光照强度为2LX。
8.如权利要求1所述的建立方法，其特征在于，步骤(4)中，所述生根培养基为：1/2MS+3％蔗糖+0.4mg/L IAA+0.02mg/L IBA，pH5.7±0.1。
9.如权利要求1所述的建立方法，其特征在于，步骤(4)中，生根培养的条件为：每天28℃下光照培养16h，光照强度为2LX。
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