[发明专利]一种针对细胞骨架蛋白β-actin的纳米抗体及其编码序列

说明书

本发明公开了针对细胞骨架蛋白β‑actin的纳米抗体及其决定抗体特异性的互补决定区(CDR)编码序列。所述抗体是含有SEQ ID NO:1所示CDR1氨基酸序列、SEQ ID NO:2所示CDR2氨基酸序列及SEQ ID NO:3所示CDR3氨基酸序列。本发明涉及的一种针对β‑actin纳米抗体能够良好地特异性结合细胞骨架蛋白β‑actin。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及针对细胞骨架蛋白β-actin纳米抗体的氨基酸序列、编码纳米抗体的核苷酸序列、能够表达所述纳米抗体的表达载体及宿主细胞。

背景技术

Actin即“肌动蛋白”，是细胞的一种重要骨架蛋白。同时Actin在细胞分泌、吞噬、移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用。Actin在不同物种之间高度保守，以至于很难获得较好的针对actin的抗血清。β-actin是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分，也是肌肉细丝及细胞骨架微丝的主要成分。具有收缩功能，分布广泛。β-actin由375个氨基酸组成，分子量大小为42-43kDa左右。在生物医学研究领域，β-actin的表达量常作为蛋白免疫印迹的内参指数。内参即是内部参照(Internal Control)，对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白。它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。β-actin的蛋白水平通常不会发生改变，因此被广泛用于蛋白免疫印迹时上样量是否一致的参照，也常被用于免疫染色观察细胞的微丝结构。

纳米抗体(variable domain ofthe heavy chain of HCAbs,VHH)是一种由天然缺失轻链的重链抗体可变区构成的小分子抗体(晶体结构直径2.5纳米，长度4纳米)，其最初是由比利时科学家在骆驼科动物体内发现。纳米抗体因其分子量小，具有亲和力高、稳定性强、组织相容性好及易筛选、易制备等特点，近年来在治疗型药物抗体、临床检测型抗体、科研运用型抗体等方面得到了广泛的研究与发展。纳米抗体的结构主要分为骨架区和互补决定区，前者在同源纳米抗体氨基酸序列中高度保守；主要负责纳米抗体基本结构的完整，后者主要针对不同的抗原出现复杂多样，其是抗原-抗体结合的决定区域。所以成功筛选的纳米抗体在于获得可以介导与抗原特异性结合的互补决定区。纳米抗体中的互补决定区(CDR)根据其在整个抗体中的位置不同，分为三个独立区域，即互补决定区1、互补决定区2和互补决定区3。

发明内容

本发明的首要目的是提供一种细胞骨架蛋白β-actin的纳米抗体，也可描述为针对细胞骨架蛋白β-actin的纳米抗体。

本发明的第二个目的是提供一种针对β-actin的纳米抗体的互补决定区的编码序列。

本发明的第三个目的是提供一种含有β-actin的纳米抗体的互补决定区的编码序列的表达载体。

本发明的第四个目的是提供一种含有β-actin的纳米抗体的互补决定区的编码序列的表达载体的宿主细胞。

为实现本发明的目的，提供了如下的技术方案：

本发明的一种细胞骨架蛋白β-actin的纳米抗体，其特征在于：所述纳米抗体的互补决定区1、互补决定区2和互补决定区2分别含有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2及SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。

本发明的一种细胞骨架蛋白的β-actin的纳米抗体的互补决定区1-3的编码序列：其互补决定区1-3的核苷酸序列，分别含有SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5及SEQ ID NO:6所示的序列。

本发明的一种含有细胞骨架蛋白的β-actin的纳米抗体的互补决定区1-3的编码序列(DNA序列)的表达载体，所述编码序列：其互补决定区1-3的核苷酸序列，分别含有SEQID NO:4、SEQ ID NO:5及SEQ ID NO:6所示的序列。