[发明专利]用于预测、检测和减少涉及免疫球蛋白单可变结构域的测定法中的非特异性蛋白干扰的技术

说明书

本发明提供，并且在某些具体但非限制性的方面中涉及：方法，所述方法用于修饰和/或改进ISV’s从而消除或减少其产生所述蛋白干扰或所述信号的倾向；‑可以引入ISV的修饰，其消除或减少所述ISV产生所述蛋白干扰或所述信号的倾向；‑被特异性选择(例如，使用本文所述的测定法)从而不具有或具有较低/减小的产生所述蛋白干扰或所述信号的倾向的ISV’s；‑被修饰和/或改进的ISV’s，其不具有或具有较低/减小的产生所述蛋白干扰或所述信号的倾向。

本申请是申请日为2012年6月25日、发明名称为“用于预测、检测和减少涉及免疫球蛋白单可变结构域的测定法中的非特异性蛋白干扰的技术”的中国专利申请No.201280030902.9的分案申请。

技术领域

本发明涉及免疫球蛋白单可变结构域领域。

背景技术

免疫球蛋白单可变结构域或“ISV”在本文中通常定义为这样的氨基酸序列，其

-包含免疫球蛋白折叠或在适合的条件下(如生理条件下)能够形成免疫球蛋白折叠(即通过折叠)，即从而形成免疫球蛋白可变结构域(如，例如，VH，VL或VHH结构域)；

和

-形成(或在这样适合的条件下能够形成)免疫球蛋白可变结构域，其包含功能性抗原结合位点(在其不需要与另一个免疫球蛋白可变结构域相互作用(如VH-VL相互作用)以形成功能性抗原结合位点的意义上)。

本领域目前已知的免疫球蛋白单可变结构域的一些实例是VHH’s和/或(其它)纳米抗体,dAb’s和(单)结构域抗体。在这些之中，到提交本申请之日时，各种纳米抗体处于I期和II期临床试验中。这使得获得可靠的测定法变得重要，所述测定法用于分析来自用ISV’s治疗的人(如临床试验受试者，和在所述ISV’s上市后，用所述ISV’s治疗的患者)的生物样品。

这不仅对于管理目的是重要的，而且对于用生物药物治疗患者也是重要的，因为开出所述治疗处方的临床医生也希望获得监测治疗的各个方面的可靠测定法。

例如，在生物药物分子的临床开发中，重要的是评估它们的免疫原潜力，以及具体地它们可以激发所谓“抗-药物抗体”或“ADA’s”的程度。这可以使用所谓的“抗-药物抗体”或“ADA’s”(免疫测定法)进行测定(见例如Shankar等的综述，Journal of Pharmaceuticaland Biomedical Analysis(药物和生物医学分析杂志),48(2008),1267-1281；以及Mire-Sluis等,J.Immunol.Meth.289(2004),1-16；Peng等,Journal of Pharmaceutical andBiomedical Analysis(药物和生物医学分析杂志),54,(2011),629-635；和Loyet等,J.Immunol.Meth.345(2009),17-28。所述ADA测定法和进行该测定法的方法是药学领域的标准常识并且在生物药物产品的临床开发中常规使用它们(并且也为世界上的各个管理机构所要求)。

例如，如在Mire-Sluis的文章第3和第4页上所述，并且如例如也在Peng的文章的图中示意性地举例，已知许多不同的ADA测定法形式，如“ELISA-桥接形式”，“ELISA-直接形式”，“间接形式”，放射免疫沉淀测定法(RIP),“表面等离振子共振”和“电化学发光-桥接形式”。本领域技术人员清楚进行ADA免疫测定法的其它形式。

技术人员也熟悉许多不同的商购技术平台，其已经显示适合于建立和进行ADA测定法。这些包括但不限于MSD平台(Mesoscale)，Gyrolab(Gyros)和octet平台(Fortebio)。

ADA测定形式的一些非限制性实例也在图1A-1C中示意性地显示。