[发明专利]一种噬菌体鸡尾酒及其应用

说明书

本发明公开了一种噬菌体鸡尾酒及其应用，该噬菌体组合物包括以下(1)～(4)中的四株分离自不同地区的青枯菌专性裂解性噬菌体：(1)噬菌体NJ‑P3，保藏编号为：CCTCC NO：M 2018099；(2)噬菌体NB‑P21，保藏编号为：CCTCC NO：M 2018100；(3)噬菌体NC‑P34，保藏编号为：CCTCC NO：M 2018101；(4)噬菌体NN‑P42，保藏编号为：CCTCC NO：M 2018102；上述的噬菌体均于2018年3月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为Podoviridae phage。四株分离自不同地区的青枯菌专性裂解性噬菌体进行组合对青枯病的防治具有显著的协同增效作用。

技术领域

本发明属于环境友好型生防制剂，涉及噬菌体鸡尾酒(即噬菌体组合物)及其应用，专用于防治土传青枯病问题。

背景技术

土传青枯病是由茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种细菌性病害，目前在我国大部分地区都有发生，南方地区病情较重。目前科学家已从自然环境中分离筛选出大量青枯菌专性噬菌体，并研究它们应用效果和作用机制。由于噬菌体疗法大多数只考察了单一噬菌体的效果，而且抑病效果往往不稳定，噬菌体疗法还未得到广泛的认可和大面积推广。综合分析发现单一噬菌体疗法存在以下局限性：噬菌体具有高度的特异性，宿主范围窄，所以噬菌体往往只对某一型或几型的宿主细菌有效，而对其他菌株裂解效果很弱或无治疗作用。2)青枯菌基因组中的大质粒携带了有助于提高青枯菌致病及适应能力的基因簇或遗传岛。对于单一噬菌体侵染胁迫，青枯菌很容易进化适应形成抗性，甚至会诱导青枯菌致病性增加。3)噬菌体具有“原位适应性”，即噬菌体更容易侵染来自同一块土壤的细菌，而对来自其他土壤中的细菌感染力相对较弱，这制约噬菌体疗法的广泛的应用。

为提高噬菌体疗法在土传青枯病防控中的应用效果，我们利用分离自不同地区的4株青枯菌专性裂解性噬菌体构建了不同丰富度的噬菌体鸡尾酒，探究了噬菌体鸡尾酒在盆栽条件下抑制青枯菌入侵番茄根际的能力。

发明内容

针对土传青枯病病原菌(Ralstonia solanacearum)种间遗传复杂、变异性强，单一噬菌体制剂防治效果不稳定的问题，提出利用来自环境中具有高效裂解作用的噬菌体构建噬菌体鸡尾酒(即噬菌体组合物)的防控方案，探究病原菌响应噬菌体多样性胁迫的机制，为开发高效稳定的噬菌体制剂提供理论和技术支撑。

本发明的另一目的在于提供上述噬菌体组合物在防治土传青枯病中的应用。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种用于防治土传青枯病的噬菌体组合物，该噬菌体组合物包括以下(1)～(4)中的四株分离自不同地区的青枯菌专性裂解性噬菌体：

(1)噬菌体NJ-P3，保藏编号为：CCTCC NO：M 2018099，分离自江苏南京(118°57'E,32°03'N)；

(2)噬菌体NB-P21，保藏编号为：CCTCC NO：M 2018100，分离自浙江宁波 (121°67'E,29°91'N)；

(3)噬菌体NC-P34，保藏编号为：CCTCC NO：M 2018101，分离自江西南昌 (115°51′E,28°41′N)；

(4)噬菌体NN-P42，保藏编号为：CCTCC NO：M 2018102，分离自广西南宁 (108°21′E,22°49′N)；

上述的噬菌体均于2018年3月6日保藏于中国典型培养物保藏中心(中国武汉，武汉大 学)，分类命名为Podoviridae phage。

作为一种优选技术方案，上述的噬菌体组合物中各噬菌体所占的比例相同。