[发明专利]一种反胶束萃取-脉冲电场联合分离提纯蛋白的方法

权利要求书

1.一种反胶束萃取-脉冲电场联合分离提纯蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将目标蛋白原料加入反胶束溶液中，混合均匀后转移至脉冲电场提取腔中，脉冲电场提取腔置于冷却槽中，进行脉冲电场联合反胶束萃取；

脉冲电场采用双极性脉冲电源；脉冲电场联合反胶束萃取的条件为：调节高低压电极间距为3～5mm，接通双极性脉冲电源，脉冲宽度200ns-2μs，电场强度5-30kV/cm，脉冲频率10-500Hz，处理时间为4～6分钟；

(2)将步骤(1)处理后的脉冲电场提取腔中溶液进行固液分离，取上清液即得目标蛋白的前萃取液；

(3)对所得前萃取液进行反萃取，得含目标蛋的后萃取液；反萃取在脉冲电场中进行，脉冲条件为：电场强度4～6kV/cm，脉冲宽度450～550ns，脉冲频率80～120Hz，处理时间6～10分钟；

(4)所得后萃取液浓缩干燥后即得目标蛋白。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述目标蛋白原料为菜籽粕、大豆粉或含有藻蓝蛋白的浓缩液。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述反胶束溶液为十二氨基磺酸钠/异辛烷反胶束体系、十六烷基三甲基溴化铵/正辛醇反胶束体系或丁二酸二异辛酯磺酸钠/异辛烷反胶束体系。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，反胶束溶液中目标蛋白原料的加入量为0.01g/mL～0.05g/mL。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，脉冲电场联合反胶束萃取的条件为：调节高低压电极间距为3～5mm，接通双极性脉冲电源，脉冲宽度400～600ns，电场强度5～10kV/cm，脉冲频率80～120Hz，处理时间为4～6分钟。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，脉冲电场联合反胶束萃取的条件为：调节高低压电极间距为4mm，接通双极性脉冲电源，脉冲宽度500ns，电场强度8～10kV/cm，脉冲频率100Hz，处理时间为5 分钟。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(3)反萃取在脉冲电场中进行，脉冲条件为：电场强度5kV/cm，脉冲宽度500ns，脉冲频率100Hz，处理时间8分钟。