[发明专利]一种马属隐孢子虫病的检测试剂盒及其检测方法

说明书

本发明提供一种马属隐孢子虫病的检测试剂盒及其检测方法。该试剂盒包括氨基酸序列为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示的6条多肽。该检测方法包括步骤：(1)用分离液分离待测样本，将分离好的细胞重悬于无血清培养基中；(2)向重悬后的细胞中加入氨基酸序列为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示的6条多肽进行共孵育，然后向共孵育的体系中加入高特异性鼠抗人IgG抗体进行抗原抗体反应；(3)对抗原抗体反应后的体系进行洗涤，再加入显色底物进行显色反应，计数反应生成的斑点数。本发明的试剂盒能够人工全序列合成，生产方便快捷，稳定性和特异性高，且试剂盒操作简便，极大地降低了成本。

技术领域

本发明属于兽医医疗检测技术领域，具体涉及一种马属隐孢子虫病的检测试剂盒及其检测方法。

背景技术

隐孢子虫(Cryptosporidium)是重要的食源性和水源性人兽共患原虫之一，属内种类和基因型较多，多数具有宿主适应性，对宿主的致病性存在差异，同时其基因型分布存在地理特征。隐孢子虫病被认为是人类最常见的6种腹泻疾病之一，免疫功能正常者呈自限性感染，而对儿童、HIV感染者及免疫缺陷疾病患者则引起急性、迁延性和慢性腹泻，甚至导致死亡。

近年来基于分子生物学检测，马感染的隐孢子虫种类/基因型呈现多样性，以微小隐孢子虫和隐孢子虫基因型为主要感染种类/基因型，世界范围内，马隐孢子虫感染率为0-37％，为快速准确检测出马属隐孢子虫病，可以通过抗原与抗体的特异性结合，根据循环外周血中马属隐孢子虫病的抗体的数量，可判断是否感染马属隐孢子虫病，用于马属隐孢子虫病感染的临床辅助诊断，可以快速、敏感的检测出人体的感染情况。寄生于马属动物的隐孢子虫不仅可导致幼龄动物严重腹泻甚至死亡，而且可引起人体感染，具有重要的公共卫生意义。目前还没有比较有效的专门针对马属隐孢子虫病的精确检测手段。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种马属隐孢子虫病的检测试剂盒及其检测方法，以期解决上述现有技术中存在的至少部分技术问题。

为了实现上述目的，本发明提供一种马属隐孢子虫病的检测试剂盒，其包括氨基酸序列为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示的6条多肽，分别为：

SEQ ID NO.1：Glu Glu Gly Ala Glu Ala Ala Val Leu Leu Ala Ala Ala GlyIle Gln Gly Ser Thr Ala；

SEQ ID NO.2：Gln Glu Leu Glu Ser Glu Ala Gly Gly Ile Arg Val Thr AlaSer Ala Arg Thr Gly Gly；

SEQ ID NO.3：Thr Met Gly Ala Gly Ile Glu Arg Arg Glu Thr Ala Ala ProAla Thr Ala Thr Gly Ala；

SEQ ID NO.4：Glu Ala Met Asp Leu Leu Ser Glu Ala Glu Ala Thr Ile AlaSer Thr Gly Gly Ala Ala；

SEQ ID NO.5：Gly Leu Thr Ile Val Gly Glu Gly Ser Leu Lys Ala Gly AlaAla Thr Ala Ile Gly Glu；

SEQ ID NO.6：Thr Ala Ile Glu Gly Asp Ser Ala Thr Gly Leu Glu Ala AlaMet Ser Ala Ile Gly Ala。

本发明中，氨基酸序列为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示的6条多肽在试剂盒中作为TB刺激物，用于检测反应。