[发明专利]沙棘中酚类物质定量检测方法

权利要求书

1.一种沙棘中酚类物质定量检测的方法，包括：

制备混标工作液：将多种酚类标定物溶于溶剂中，得到混标工作液；所述多种酚类标定物为芦丁、异鼠李素、山奈酚、杨梅素、柚皮素、槲皮素和维生素E；

制备内标溶液：将2-Cl-苯丙氨酸溶于溶剂中，得到内标溶液；

制备标准曲线：取N组不同体积的所述混标工作液和N组相同体积的所述内标溶液混合，对所得混合液进行GC-MS分析，得到标准曲线；其中对所得混合液进行GC-MS分析时，所述芦丁、异鼠李素、山奈酚、杨梅素、柚皮素、槲皮素和维生素E的定量离子分别为217、589、559、735、545、647和237；和

处理沙棘样品，得到检测样本进行GC-MS分析，根据所述标准曲线定量检测沙棘中酚类物质；

所述处理沙棘样品包括提取沙棘内含物和衍生化所述沙棘内含物；

其中所述衍生化所述沙棘内含物的方法为：挥干所述沙棘内含物，得到挥干后的待测品；向所述挥干后的待测品中加入甲氧胺盐酸吡啶溶液后，进行震荡培养，得到震荡培养待测物；向所述震荡培养待测物中加入BSTFA衍生试剂进行反应，得到衍生化待测品；室温条件下放置所述衍生化待测品，得到检测样本，进行GC-MS分析；

所述GC-MS分析采用高纯氦气作为载气，载气流速1.0mL/min；

所述GC-MS分析采用的升温程序为：以15℃/min从60℃升温至170℃；以5℃/min从170℃升温至305℃；305℃维持6.7min；

所述GC-MS分析的进样口温度为260℃，EI源温度为230℃，电压为70V；

所述GC-MS分析的质量扫描范围：m/z 55-800，延迟12min开始采集，采集速度为20谱/秒。

2.根据权利要求1所述的沙棘中酚类物质定量检测的方法，所述混标工作液和所述内标溶液的溶剂为甲醇。

3.根据权利要求2所述的沙棘中酚类物质定量检测的方法，所述制备混标工作液步骤中，所述混标工作液中芦丁、异鼠李素、山奈酚、杨梅素、柚皮素、槲皮素和维生素E的浓度分别为：芦丁0.125mg/mL、异鼠李素0.00625mg/mL、山奈酚0.5μg/mL、杨梅素2.5μg/mL、柚皮素2.5μg/mL、槲皮素5μg/mL和维生素E 25μg/mL；和/或

所述制备内标溶液步骤中，所述内标溶液中2-Cl-苯丙氨酸的浓度为0.03mg/mL。

4.根据权利要求3所述的沙棘中酚类物质定量检测的方法，所述制备标准曲线的步骤中，所述N为大于或等于5的整数；和/或

所述N组不同体积的所述混标工作液的体积为0-400μL中的任意N组；和/或

所述N组相同体积的所述内标溶液的体积均为40μL。

5.根据权利要求4所述的沙棘中酚类物质定量检测的方法，所述制备标准曲线的步骤中，所述N为7；

所述N组不同体积的所述混标工作液的体积为400μL、200μL、100μL、40μL、20μL、10μL和4μL。

6.根据权利要求2所述的沙棘中酚类物质定量检测的方法，所述制备混标工作液步骤中，所述混标工作液包括混标工作液A和混标工作液B；

所述混标工作液A的制备方法为：

制备标准储备液：将芦丁、异鼠李素溶于溶剂中，分别制备得到0.5mg/mL的芦丁标准储备液和0.025mg/mL的异鼠李素标准储备液；和

制备混标工作液A：按照体积比为1:1将所述芦丁标准储备液和异鼠李素标准储备液混合，得到混标工作液A；

所述混标工作液B的制备方法为：

制备标准储备液：取山奈酚、杨梅素、柚皮素、槲皮素、维生素E溶于溶剂中，分别制备得到1mg/mL的标准储备液；

制备标准品工作液：分别稀释所述山奈酚、杨梅素、柚皮素、槲皮素和维生素E的标准储备液，得到10μg/mL的山奈酚标准品工作液、50μg/mL的杨梅素标准品工作液、50μg/mL的柚皮素标准品工作液、100μg/mL的槲皮素标准品工作液和500μg/mL的维生素E标准品工作液；和

制备混标工作液B：取相同体积V的各标准品工作液混合后，用甲醇稀释至体积为10V，得到混标工作液B。