[发明专利]与德高CR117大白菜抗根肿病性状紧密连锁的SSR分子标记、试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了与德高CR117大白菜抗根肿病性状紧密连锁的SSR分子标记及其应用，属于大白菜育种技术领域。本发明提供了与德高CR117大白菜抗根肿病性状紧密连锁的SSR分子标记及用于扩增的引物对。本发明提供的SSR分子标记在筛选具有抗根肿病性状的德高CR117大白菜及其类似大白菜品种中的应用。开发出的分子标记的应用解决了德高CR117等一类抗根肿病大白菜抗病基因的有效利用问题。标记的应用解决了该类型抗根肿病性状接种存在的鉴定周期长、病菌污染扩散以及接种鉴定存在的不准确问题。筛选准确率高，同时筛选操作简便，成本低廉，重复性好。

技术领域

本发明属于大白菜育种技术领域，具体涉及与德高CR117大白菜抗根肿病性状紧密连锁的SSR分子标记、试剂盒及其应用。

背景技术

十字花科根肿病是由芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassica Woronin)侵染引起的一种世界性病害，寄主范围很广，可危害白菜、甘蓝、萝卜、花椰菜、油菜等100多种栽培的和野生的十字花科植物。大白菜是根肿病危害最严重的十字花科蔬菜之一，近年来，我国沿海地区、云贵川、东北部分地区以及西部地区等全国大部分地区都有根肿病发生，发生面积急剧增加并逐年加重，已经成为大白菜主产区的主要病害。

由于根肿病菌休眠胞子抗逆性强，在土壤中可存活10年以上，化学防治极为困难。抗病品种的选育和应用是解决根肿病危害的根本途径。而分子标记辅助育种是选育抗根肿病大白菜品种的有效手段。目前报道的大白菜抗根肿病基因有8个，分别是Crr1、Crr2、Crr3、Crr4、CRa、CRb、CRc和 CRk(Matsumoto et al.，1998；Piao et al.，2002,2004；Suwabe et al.，2003,2006； Hirai et al.，2004；Saito et al.，2006；Sakamoto et al.，2008)，其中Crr1定位于A8连锁群，Crr2定位于A1连锁群，Crr4定位于A6连锁群，CRc定位于A2连锁群，Crr3、CRa、CRb、CRk定位于A3连锁群。发明人所在课题组利用8个已发表根肿病抗病基因相关分子标记引物，对抗病大白菜材料进行分子标记筛选利用，目前已筛选出KBrH129J18R等多个标记可用于根肿病抗性筛选，但现有抗根肿病分子标记不能标记德高CR117、康根51号等多个抗病类型相似的抗病品种，阻碍了这类品种抗病基因转育与筛选利用。因此德高 CR117类型品种抗根肿病分子标记的开发与应用，对大白菜抗根肿病育种有重要意义。

现有德高CR117类型根肿病抗病基因的利用是传统根肿病接种鉴定，杂交转育或自交分离后代抗根肿病性状的选择，只能依靠人工接种鉴定，不仅鉴定周期长、存在病菌扩散的风险并且该类抗病品种对大白菜根肿病菌抗病性表现为部分抗病性，即发病率和病情指数均不能达到0，因此接种鉴定的选择结果可靠性也不能保证。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供与德高CR117大白菜抗根肿病性状紧密连锁的分子标记、试剂盒及其应用，所述分子标记能够准确筛选德高 CR117大白菜抗根肿病性状，具有简单快速的特点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了与德高CR117大白菜抗根肿病性状紧密连锁的SSR分子标记(P16)，具有如序列表中SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

本发明提供了一种用于扩增所述的SSR分子标记的引物对，包括正向引物和反向引物，所述正向引物具有如序列表中SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；所述反向引物具有如序列表中SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。

本发明提供了一种用于鉴定德高CR117大白菜抗根肿病性状紧密连锁的试剂盒，包括所述的引物对。

本发明提供了所述的SSR分子标记、所述的引物对或所述试剂盒在筛选具有抗根肿病性状的德高CR117大白菜及其类似大白菜品种中的应用；