[发明专利]一种包载多西紫杉醇的透明质酸寡糖-壳聚糖微球及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种包载多西紫杉醇的透明质酸寡糖‑壳聚糖微球及其制备方法与应用。本发明采用EDC/NHS的方法合成透明质酸寡糖‑壳聚糖偶联产物，制备过程简单，成本较低；通过乳化交联法制备微球，制备过程简单，微球表面光滑，获得形态好、无黏连、粒径分布均匀的微球，可以实现微球制备的的批量化生产。本发明对包载多西紫杉醇的微球进行了包括载药率、包封率、药物释放以及相关的细胞实验等，为临床应用奠定基础，制备的DTX‑OHAS‑CTS微球对抑制肿瘤细胞有良好的效果，可作为治疗肿瘤的靶向药物载体。

技术领域

本发明涉及一种包载多西紫杉醇(Docetaxel,DTX)的透明质酸寡糖-壳聚糖微球及其制备方法与应用，属于药物载体制备领域。

背景技术

近年来，天然高分子材料制备的药物载体被广泛应用于疾病的治疗中，如透明质酸(Hyaluronic acid,HA)和壳聚糖(Chitoan,CTS)。透明质酸是一种由葡糖醛酸和N-乙酰氨基葡糖的双糖单位重复连接构成的酸性粘多糖，是细胞外基质的主要成份之一，发挥着一定的生理功能，如在皮肤中储存水分而起保湿作用，经研究发现，在实体肿瘤的边缘组织富集HA，同时肿瘤细胞表面高度表达HA受体CD44，HA通过受体介导信号传导途径对肿瘤的生长、粘附、转移起着重要的作用。壳聚糖是一种天然的高分子阳离子聚合物，具有良好的生物相容性、壳透气性好，并且无毒，可以提高药物的稳定性。但是，HA作为药物载体的稳定性差，易被降解，CTS作为药物载体的载药率较低；因此，将HA和CTS交联，既可以增加载体稳定性，提高载药率，又可以保留HA对肿瘤细胞的靶向性，以及CTS缓释的作用。中国专利文献CN104840428A(申请号201410050110.9)公开了一种载有表皮生长因子的透明质酸-壳聚糖微球及其制备方法和应用，该发明所提供的载有表皮生长因子的透明质酸-壳聚糖微球，通过在保护剂作用下离子聚合、离心沉淀、纯化、冻干而得，使用的透明质酸分子量为60000Da或120000Da。中国专利文献CN105694120A(申请号201410699380.2)公开了一种壳寡糖透明质酸复合纳米微粒的制备方法，采用壳寡糖和透明质酸作为原料，通过聚合物凝聚法合成壳寡糖透明质酸复合纳米微粒，该方法中使用的透明质酸的分子量为10000-50000Da。已报道透明质酸-壳聚糖微球大都采用大分子透明质酸，但是大分子的透明质酸作为肿瘤药物载体的靶向材料时靶向性弱，原因是细胞表面CD44受体与相对分子质量大的透明质酸是多价结合，会掩盖CD44受体的结合位点，导致CD44受体失活。

透明质酸寡糖(OHAS)是相对分子质量＜5000Da、单糖残基数量为2～30(一般为4～16)的透明质酸分子片段，属于小分子多糖，其性质与普通透明质酸有很大的不同，甚至具有完全相反的作用。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种包载多西紫杉醇的透明质酸寡糖-壳聚糖微球及其制备方法。本发明的透明质酸寡糖-壳聚糖微球靶向性强，制备方法过程简单，成本较低，制备的微球产品形态好、无黏连、粒径分布均匀。

本发明还提供所制备的包载多西紫杉醇的透明质酸-壳聚糖微球的应用。

术语说明：

MES缓冲液：由2-(N-吗啉)乙磺酸一水合物配制的酸性缓冲液，浓度为0.05mol/L，pH在4左右。

二级水：25℃时电阻率1MΩ*cm的水，用于制备常用试剂溶液、制备缓冲液。

本发明的技术方案如下：

一种包载多西紫杉醇的透明质酸寡糖-壳聚糖微球，所述透明质酸寡糖的分子量为700～5000Da，所述包载多西紫杉醇的透明质酸寡糖-壳聚糖微球的粒径为5～20μm。

进一步优选的，所述包载多西紫杉醇的透明质酸寡糖-壳聚糖微球的粒径为6～15μm。

一种包载多西紫杉醇的透明质酸寡糖-壳聚糖微球的制备方法，包括步骤：