[发明专利]微量铜离子浓度的检测方法

说明书

一种微量铜离子浓度的检测方法，其技术要点是，包括以下步骤：步骤1，配制检测液；步骤2，绘制标准工作曲线；步骤3，检测铜离子浓度。其具有简单方便，便于实时监测微量铜离子浓度变化，无需添加屏蔽剂来屏蔽溶液中多种其他金属离子的干扰等优点。

技术领域

本发明涉及一种基于CPHS检测液采用紫外-可见分光光度计对微量铜离子浓度进行检测的方法。

背景技术

铜是生命所必需的微量元素，很多酶如超氧化物歧化酶、细胞色素氧化酶、酪氨酸酶等都需要铜离子作为催化辅因子，在生命活动中起着重要作用。随着社会的发展，含铜农药的大量使用，含铜废水的大量排放，使得水生动物以及植物受到严重危害。

目前，离子色谱法、原子吸收法以及电化学法等都是较为成熟的铜离子检测方法，每种方法的优点和适用范围各不相同。如申请公布号为CN 104849271 A的发明专利申请公开的“一种基于花菁的探针用于检测痕量二价铜离子的方法”该技术方案通过在待测样品中加入缓冲液和L-半胱氨酸溶液在室温下进行亲核反应，而后再加入基于花菁的探针在室温下继续进行亲核反应，通过亲核反应的变化即可定性的检测样品中二价铜离子，再将亲核反应获取反应液在785nm的紫外分光光度计的吸光度，再通过标准曲线，即定量的获得待测样品中二价铜离子的浓度。可见，现有铜离子的检测方法通常需要借助昂贵的仪器，不但操作繁琐，检测时还需要加入掩蔽剂；对水样的预处理要求高，只能在特定的pH范围内进行，且无法迅速检测。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种操作简单方便，便于实时监测微量铜离子浓度的方法，无需添加屏蔽剂来屏蔽溶液中多种其他金属离子的干扰。

为了达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：该微量铜离子浓度的检测方法，其技术要点是，包括以下步骤：

步骤1，配制检测液：

步骤101，取1.6mg～36mg的HS按照1mg：2ml的比例溶解于DMSO中，在室温下搅拌1h，用HEPES稀释制得浓度为1μmol/L～100μmol/L的HS溶液；

步骤102，取CP标准溶液，用HEPES缓冲溶液稀释，在室温下搅拌5min，制得浓度为1μmol/L～100μmol/L的CP溶液；

步骤103，将制得的HS溶液与CP溶液按照摩尔比1：1混合（以溶质计，在室温下搅拌20min，即得浓度为1μmol/L～100μmol/L的CPHS检测液；

步骤2，绘制标准工作曲线：

步骤201，分别将1ml步骤1)制得的CPHS检测液加入到7个5ml EP管中，然后向其中7个EP管中分别加入1ml浓度0μmol/L~100μmol/L依次递增的铜离子标准溶液；再向7个EP管中全部加入1ml HEPES缓冲溶液，得到7组混合溶液；

步骤202，用紫外-可见分光光度计在波长λ=360nm上分别检测7组混合液，得到紫外可见光谱曲线，并进一步得到特征吸收峰的吸光度，根据吸光度和相应的已知铜离子浓度，扣除空白吸光度值后得到标准工作曲线；

步骤3，检测铜离子浓度：

步骤301，将CPHS检测液滴加到待测铜离子溶液中，充分摇匀后，静置10min，用紫外-可见分光光度计检测待测反应产物溶液，得到吸光度曲线；

步骤302，从标准工作曲线上，将波长360nm处的吸光度值带入标准曲线，即可得到与相应吸光度对应的相应铜离子浓度。

待测铜离子溶液的pH为3～9。