[发明专利]一种诱导水稻抗稻瘟病的生防菌株及筛选方法和应用

说明书

本发明公开了提供一种诱导水稻抗稻瘟病的生防菌株的筛选方法，通过选取辽宁省多个稻瘟病发病不同的水稻主产区的水稻田土样，通过土壤稀释平板法、种子包衣处理和活体叶片法试验，结果表明巨大芽孢杆菌对诱导水稻抗稻瘟病的防治效果达到71.97％。与现有技术相比，本发明的生防菌株属生物制剂，不会对环境和生态造成污染，其有利于水稻的无公害生产。

技术领域

本发明涉及水稻稻瘟病防治技术领域，特别是一种诱导水稻抗稻瘟病的生防菌株及筛选方法和应用。

背景技术

稻瘟病(Pyricularia oryzae)是一种突发性强，易于流行的重要病害，在全球主产水稻的国家均有发生。目前人们采用抗瘟品种和化学防治作为主要的防治措施，由于抗瘟品种的抗性会逐渐减弱甚至是丧失，化学药剂的残留会破坏生态环境和人畜的健康，而在植物病害的治理过程中诱导植物产生抗病性的生防菌具有防治效果显著、生态环境安全性高和不会诱导病原菌产生抗药性等诸多优点，所以在植物病害的防治领域，诱导植物产生抗病性的生防菌株具有着极大的研发潜力。

发明内容

本发明的目的是要解决现有技术中存在的不足，提供一种诱导水稻抗稻瘟病的生防菌株及筛选方法和应用。

为达到上述目的，本发明是按照以下技术方案实施的：

一种诱导水稻抗稻瘟病的生防菌株，所述生防菌株为巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)DdN5-6，保藏号为：CGMCCNo.15457。

进一步的技术方案为，所述生防菌株的培养基为NA培养基，生防菌株菌丝生长的适宜温度为28℃。

另外，本发明的另一个目的是，提供一种诱导水稻抗稻瘟病的生防菌株的筛选方法，包括以下步骤：

采用土壤稀释平板法进行土壤微生物分离及指示菌株：选取辽宁省多个稻瘟病发病不同的水稻主产区的水稻田土样，依次稀释制备10^-3、10^-4、10^-5、10^-6土壤稀释液，将土壤稀释液分别取0.5mL分别涂抹于NA培养基平板中，每一浓度培养3皿，置于28℃恒温箱中培养得到稻瘟病菌孢子悬浮液；在NA培养基平板上培养3～4d后，对NA培养基平板上长出的菌落进行分离，挑取形态、颜色等培养性状不同的单菌落经划线培养、纯化，然后转移至NA培养基斜面中再培养5d后放入4℃冰箱中保存备用；指示生防菌株为巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)。

其次，本发明的再一个目的是，提供一种诱导水稻抗稻瘟病的生防菌株在诱导水稻抗稻瘟病的防治方面的应用，具体包括：

1)种子处理：将分离获得的生防菌株转移到NA培养基平板上在28℃下活化72h，然后放入NB培养基中，在28℃，180r·min^-1的摇床发酵3d，获得分离菌株发酵液，按1:20的比例对水稻种子分别包衣处理2d；

2)活体苗期接种：取前述处理后的水稻种子进行室内盆栽，待水稻苗长至3叶1心期，分别隔离喷雾接种前述土壤稀释平板法制备的稻瘟病菌孢子悬浮液，接种量以稻瘟病菌孢子悬浮液在叶片上不流淌为限，接种后置于人工气候培养箱中管理，模拟7～8月份的气温条件，观察水稻叶片发病情况。

与现有技术相比，本发明的生防菌株对诱导水稻抗稻瘟病有较好的防治效果，通过土壤稀释平板法、种子包衣处理和活体叶片法试验，结果表明巨大芽孢杆菌对诱导水稻抗稻瘟病的防治效果达到71.97％。

本发明的生防菌株属生物制剂，不会对环境和生态造成污染，其有利于水稻的无公害生产。

附图说明

图1为菌株DdN5-6形态图。

图2菌株DdN5-6的16S rDNA序列系统发育树。

具体实施方式