[发明专利]多酚类化合物在制备死亡相关蛋白激酶乙酰化抑制剂中的应用

说明书

本发明属于医学和分子生物学技术领域，具体公开了多酚类化合物在制备死亡相关蛋白激酶乙酰化抑制剂中的应用。本发明发现癌细胞中死亡相关蛋白激酶DAPK在第978位点赖氨酸残基（K978）发生乙酰化，该位点乙酰化影响DAPK稳定性和活性，参与调节细胞生长和代谢，乙酰化的DAPK促进癌细胞生长和迁移，而多酚类化合物能抑制DAPK在该位点的乙酰化，因此多酚类化合物可用于制备DAPK乙酰化抑制剂，还可用于制备抑制癌细胞生长和迁移的制剂，还可用于制备抗肿瘤药物，对临床治疗糖尿病、卒中、神经退行性疾病和肿瘤等疾病有重要意义。

技术领域

本发明涉及医学和分子生物学技术领域，具体地，涉及多酚类化合物在制备死亡相关蛋白激酶乙酰化抑制剂中的应用。

背景技术

死亡相关蛋白激酶（Death-associated protein kinase，DAPK）是一种存在于细胞质中的Ca²⁺/钙调蛋白（CaM）依赖性的丝氨酸/苏氨酸激酶，蛋白质分子量为160kDa。DAPK含多个功能结构域：典型的Ser/Thr激酶结构域；Ca²⁺/CaM调节结构域；含8个锚定重复序列（Ankyrin repeats）的结构域；Ras蛋白质复合体-Ras蛋白质复合体C末端结构域（ROC-CORdomain, Ras of complex proteins-C-terminal of ROC domain）；DAPK在C-末端含一个典型的死亡结构域，死亡结构域后的C-末端是由17个氨基酸残基组成的富含Ser残基区域，该区域是DAPK激酶活性的负调控结构域（如图1所示）。

DAPK作为一种抑制细胞生长的正向调节因子，可被多种因素所激活。从目前各方面的研究结果显示，DAPK参与细胞多种生理和病理过程：凋亡、自噬、糖代谢、免疫反应、肿瘤转移、tau蛋白病、细胞转化等。DAPK不仅是多种因素诱导细胞凋亡信号的汇合点，还参与抑制肿瘤细胞转移。但是，目前现有技术中尚不清楚DAPK是否存在乙酰化位点，以及乙酰化位点与肿瘤细胞生长和转移的关系。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的上述不足，提供多酚类化合物在制备死亡相关蛋白激酶乙酰化抑制剂中的应用。本发明发现多酚类化合物能够抑制肿瘤细胞或癌细胞中DAPK第978位点赖氨酸残基（K978）发生乙酰化。

本发明的另一目的在于提供多酚类化合物在制备抑制肿瘤细胞或癌细胞生长增殖和/或迁移的制剂中的应用。

本发明的另一目的在于提供多酚类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的另一目的在于提供白藜芦醇在制备通过抑制死亡相关蛋白激酶乙酰化进而抑制癌细胞生长增殖和/或迁移的制剂中的应用。

本发明的另一目的在于提供高良姜素在制备通过抑制死亡相关蛋白激酶乙酰化进而抑制癌细胞生长增殖和/或迁移的制剂中的应用。

本发明的另一目的在于提供死亡相关蛋白激酶的乙酰化位点在制备癌症诊断试剂盒中的应用。

为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：

本发明用免疫共沉淀技术结合LC-MS/MS技术分析首次发现癌细胞中DAPK在第978位点赖氨酸残基（K978）发生乙酰化，该位点乙酰化影响DAPK稳定性和活性，参与调节细胞生长和代谢，乙酰化的DAPK促进癌细胞生长和迁移。因此，可将该位点作为抑制肿瘤细胞或癌细胞生长和转移的靶点，通过抑制该位点乙酰化，进而抑制肿瘤细胞或癌细胞的生长增殖和转移。此外，该位点还可作为细胞抗衰老的靶点，通过抑制该位点乙酰化，进而抑制细胞的衰老和分化。