[发明专利]简便快速检测尿素的微流控双水相液滴流方法及其装置

说明书

一种简便快速检测尿素的微流控双水相液滴流方法及其装置，步骤如下：以中性红指示剂和待测样品以及聚乙二醇混合溶液为内水相，以脲酶和葡聚糖混合溶液为外水相；通过本微流控装置，利用两相流体的剪切作用在入口处形成10～30纳升的双水相液滴，尿素与脲酶在该液滴内和界面处发生酶促反应，产物碳酸铵使液滴内的中性红指示剂变色，根据变色程度判断样品中是否含有尿素以及分析尿素含量的高低，1次样品检测仅需10～20秒的时间，且含酶外水相溶液可循环使用。本方法检测范围更大，操作成本较低、简单快速且对环境友好。

技术领域

本发明涉及化学品检测方法，尤其是具有简便快速特点的尿素检测方法。

背景技术

在工农医等行业生产中，如水质、土壤、食品、药品以及血液都需要检测其中尿素的含量。因此，检测尿素含量有着十分重要的意义。实验室常规尿素检测方法如凯氏定氮仪法都是检测总氮含量，并不能排除其它含氮化合物的影响而特异性的测出样品中尿素的含量；同时，市售常见的尿素测定仪器一般测量量程为0～0.2mg·mL-1，不适用于高浓度尿素的测量；并且它们都有着耗时长，仪器昂贵，化学试剂用量大等缺点，并伴随着不可避免地带来了环境污染。另一类常见的检测方法如拉曼光谱和电化学法，操作复杂，成本很高。

除上述常见的尿素检测方法和仪器外，也有一些科研工作者提出用显色法或显色试纸的方法来检测尿素含量。1986年高世忠等人[1]提出了一种二乙酰一肟与尿素反应生成有色复合物的方法(见高世忠吕介芳,吕永昌.牛乳中掺杂尿素及牛尿的快速定性分析[J].中国乳品工业,1986(3):14-16.)，通过是否显色来判断有无尿素，但二乙酰一肟并非只与尿素反应显色，与其代谢产物瓜氨酸反应也有显色，此种测量方法并不能排除瓜氨酸对尿素浓度的影响。2009年，杨水云等人[2]发明了一种检测尿素含量的试纸(见杨水云,马晓明,徐凡,等.乳品中尿素检测试纸的制备及尿素检测方法:CN101398386[P].2009.)，制备试纸的过程较为复杂且不易保存，保存和现场测试过程中较易受环境因素如pH值、湿度等的影响。2012年喻东威等人[3]提出了一种定性检测尿素的方法(见喻东威,赵源,刘志楠,等.一种乳中尿素定性检测方法:CN102539421A[P].2012.)，用溴百里香酚蓝乙醇溶液对尿素的酶溶液进行显色反应。该方法只能通过阳性对照组来比较，且操作过程复杂，测试中试剂用量大，易对环境造成污染。

由此可见，市场上仍缺乏一种快速、简便、试剂消耗量小、经济实用地判断出样品中是否含有尿素，并能得出尿素含量的分析方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种能简便快速定性定量检测尿素的微流控双水相液滴流装置。

本发明的目的是这样实现的：一种简便快速检测尿素的微流控双水相液滴流装置，由按同一轴线设置的内水相进料毛细管和内水相出料毛细管以及外水相进料毛细管构成；内水相进料毛细管的左端为平口端，作为内水相进料口，右端为锥口端作为其出料口，内水相进料毛细管从外水相进料毛细管左端插入其内腔；内水相出料毛细管的左端为锥口端，作为其进料口，右端为平口端，作为其出料口，内水相出料毛细管从外水相进料毛细管右端插入其内腔；内水相进料毛细管的锥口端内径＜内水相出料毛细管锥口端内径的；内水相注射器经硅胶管与内水相进料口连接，外水相注射器经硅胶管与外水相进料毛细管的左端进料口连接，上述内、外水相注射器分别固定在内、外水相注射泵的泵伸缩杆的夹头上，由注射泵提供推进动力。

本发明的另一目的是提供一种采用上述微流控装置简便快速进行尿素检测的方法。