[发明专利]一种检测鳗鲡疱疹病毒的引物组、试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 201810338435.5 | 申请日： | 2018-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN108315487B | 公开（公告）日： | 2021-06-22 |
| 发明（设计）人： | 葛均青;陈强;宋铁英 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 刘奇 |
| 地址： | 350000 福建*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 鳗鲡 疱疹病毒 引物 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种用于检测鳗鲡疱疹病毒的引物组，其特征在于，所述引物组包括两条外引物F3-EHV和B3-EHV、两条内引物FIP-EHV和BIP-EHV、两条环引物LF-EHV和LB-EHV；
各引物的碱基序列5’-3’如下：
F3-EHV：GGCATCGAGATGATGCACAA；
B3-EHV：TCCGCGGAAGAGAGACAG；
FIP-EHV：GAGGAACCTGGTGGCATCAGACGACAACATGCCGTGGATCG；
BIP-EHV：ATCACTTCAAAACCGGCCGCGACGGTGTCGTAGTACGGATA；
LF-EHV：GCGCGGCAGGCATATCTA；
LB-EHV：TCGAAGGCGCTGTACTACAA。
2.权利要求1所述引物组在制备检测鳗鲡疱疹病毒试剂盒中的应用。
3.一种用于检测鳗鲡疱疹病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的引物组，反应缓冲液，DNA聚合酶和阳性对照。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述引物组含有30～50μM F3-EHV，30～50μM B3-EHV，3～7μM FIP-EHV，3～7μM BIP-EHV，15～25μM LF-EHV，15～25μM LB-EHV。
5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述反应缓冲液含有30～50mM Tris缓冲液、15～25mM KCl、7～25mM MgSO4、15～25mM(NH4)2SO4、体积百分比0.1～0.3％吐温20、1～2M甘氨酸三甲胺内盐、0.5～1.5mM MnCl2、40～60μM钙黄绿素和dNTP预混液；
所述dNTP预混液中dATP、dGTP、dTTP、dCTP的浓度分别为2.5～4mM。
6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的DNA聚合酶为Bst2.0WarmStartDNA聚合酶。
7.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的阳性对照为含有鳗鲡疱疹病毒ORF51基因的质粒。
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