[发明专利]沿海紫金牛植物资源快速建立及繁殖方法

权利要求书

1.一种沿海紫金牛植物资源快速建立及繁殖方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）材料选取与消毒：剪取饱满成熟的沿海紫金牛浆果，放入保鲜袋包好，带回实验室后，将紫金牛浆果周围杂质除尽并且去除假种皮，置饱和漂白粉上清液中浸泡15min，再置于流水中冲滴0.5h，并用软毛刷轻轻刷洗，冲洗干净后，用双蒸水冲洗2~3次，置超净工作台用75%的酒精消毒30s后倒去酒精，加入0.1%升HgCl₂处理10~13min，然后将HgCl₂汞液倒入废汞瓶中，用无菌水冲4~6遍后，用消毒滤纸吸干表面水分后，待用；

2）诱导培养：用经过消毒的手术刀将果实纵切，镊子夹取粉状种子，移到培养瓶口， 轻轻敲打镊子, 使种子均匀散落到芽诱导培养基上, 盖好瓶盖放于培养室中培养；培养条件：培养室温度为23±2℃，光照时间5h/d，光照强度：接种后5~8d在无灯光条件下培养，无灯光培养结束后光照强度调整为1000~1500lx，培养时间15~20d，得到诱导芽植株；

3）增殖培养：将经上述诱导培养，所得到的生长良好的芽植株切成茎段长1.0~1.5cm，接种在增殖培养基中，光照时间10h/d，光照强度1500~2000lx，增殖培养时间20~30d，得到增殖培养的幼苗；

4）诱导生根：将增殖培养出来带有叶2~3片，株高3~4cm无根幼苗单株切下，转移到生根培养基中；光照时间10h/d，光照强度1500~2000lx，诱导生根时间15~20d，得到诱导生根的幼苗；

5）试管苗培养完成：当诱导生根培养试管苗生长至高5~6cm，根3~5条，叶5片，叶长2~3cm时完成沿海紫金牛种子诱导萌发及快速繁殖培养；

6）将完成生根培养试管瓶苗放在自然光下炼苗5~7d后，打开瓶盖炼苗1~2d，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后从培养瓶中取出培养植株，洗去附着在根系的残留培养基，移入蛭石和腐殖土的质量比1：2混合的基质中，保湿遮阴，温度控制在15~30℃，湿度应保持在75~85％，避免阳光直射；2~3周后植株适应能力逐渐增强，获得自然生长健壮完整种苗；

其中芽诱导培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LKT+0.1mg/LNAA+20g/L蔗糖+5.5g/L琼脂粉+1.0 g·L^-1活性炭； pH值为5.8；

其中增殖培养基为MS+3.0mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+20g/L蔗糖+5.5g/L 琼脂粉+1.0g·L^-1活性炭； pH值为5.8；

其中生根培养基为1/2MS+1.5mg/L IBA+0.1mg/L NAA+25g/L蔗糖+6.5g/L琼脂粉+1.5g·L^-1活性炭； pH值为5.8。