[发明专利]一种强凝胶性肌原纤维蛋白的制备方法在审
| 申请号： | 201810325637.6 | 申请日： | 2018-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN108617848A | 公开（公告）日： | 2018-10-09 |
| 发明（设计）人： | 凌雪萍;马荣荣;卢英华;何宁;吴雪娥;车黎明;李正龙 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | A23J1/04 | 分类号： | A23J1/04 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人： | 张松亭;姜谧 |
| 地址： | 361000 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 肌原纤维蛋白 凝胶性 制备 焦性没食子酸 混合蛋白 浓缩液 三维网络凝胶 食品加工辅料 超高压处理 程序升温 抗氧化性 鱼肉制品 真空包装 超高压 骤冷 溶解 弱化 浓缩 下放 | ||
1.一种强凝胶性肌原纤维蛋白的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)向搅碎后的鱼糜中加入第一分离缓冲液，依次经均质处理和离心，除去可溶性蛋白，得第一沉淀，再向该第一沉淀中加入第二分离缓冲液，依次经均质处理、过滤和离心，得第二沉淀；上述第一分离缓冲液的pH为6.9～7.1，包括0.08～0.12M KCl，1.8～2.2mMMgCl2，0.8～1.2mM EGTA、0.4～0.6mM DTT和8～11mM K2HPO4；上述第二缓冲液的pH为5.9～6.1，包括0.08～0.12M NaCl和0.8～1.2mM NaN3；
(2)向上述第二沉淀中加入冷的溶解缓冲液，均质后于～1～2℃放置25～40min，然后离心取上清，再用超滤管浓缩，得浓缩液；上述溶解缓冲液为0.5～0.7M NaCl溶液，pH为7.9～8.1；
(3)再上述浓缩液中加入焦性没食子酸，混合均匀，常温下放置1～5h后，得到混合蛋白溶液；上述焦性没食子酸在浓缩液中的浓度为6u～300u mol/g蛋白；
(4)将上述混合蛋白溶液进行真空包装，置于超高压100～600MPa下处理5～25min；
(5)将步骤(4)所得的物料置于18～22℃的水浴中，以0.8～1.2℃/min的速率升温至82～86℃，保温25～40min，然后立即于0℃放置10～13h，即得所述强凝胶性肌原纤维蛋白。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述第一分离缓冲液的pH为7.0，包括0.1M KCl，2mM MgCl2，1mM EGTA、0.5mM DTT和10mM K2HPO4。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述第二缓冲液的pH为6.0，包括0.1MNaCl和1mM NaN3。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述溶解缓冲液为0.6M NaCl溶液，pH为8.0。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的均质处理的条件为7000～10000rpm，3～8min。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)和(2)中的离心的条件为7000～9000rpm，10～30min，4～8℃。
7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)为：将上述混合蛋白溶液进行真空包装，置于超高压400MPa下处理15min。
8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)为：将步骤(4)所得的物料置于20℃的水浴中，以1℃/min的速率升温至85℃，保温30min，然后立即于0℃放置12h，即得所述强凝胶性肌原纤维蛋白。
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