[发明专利]一种基于接触角变化检测尿糖异常的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种基于接触角变化检测尿糖异常的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括包被有异丙基丙烯酰胺-丙烯酰硫脲基氨基苯硼酸共聚物的硅片，尿液预处理液和复苏液；

其中，包被有糖敏感聚合物的硅片的制备方法为：将异丙基丙烯酰胺，丙烯酰硫脲基氨基苯硼酸，二硫代苯甲酸苄酯和引发剂偶氮二异丁腈按摩尔比180:20:2:1加入到schlenk管中，加入体积比为4:1的1，4-二氧六环/甲醇溶剂进行溶解，采用冷冻解冻泵循环法脱气至少3次，在70℃油浴下反应20小时，加入氯仿终止聚合反应，产物用大量的正己烷沉淀，将沉淀溶于氯仿，再用正己烷沉淀，重复3～4次，将产物真空干燥过夜，得到浅橙色粉末；然后将浅橙色粉末用氯仿溶解后备用；取硅片用0.1M的NaOH浸泡10min，晒干后用0.1M的HNO₃清洗10min，然后反复用水清洗3次，将之前的氯仿溶解的聚合物溶液涂覆在清洗后硅片上，自然晾干，从而在硅片上形成20-50nm的糖敏感聚合物膜即得；

所述尿液预处理液为含有0.5wt％叠氮钠的无水乙醇溶液，

所述复苏液为含有0.1wt％柠檬酸和0.9％NaCl的水溶液；

所述试剂盒的使用方法包括如下步骤：

1)将尿液样本按照尿液与尿液预处理液体积比5：1混合，离心取上清液；

2)将上清液滴加于包被有糖敏感聚合物的硅片，用接触角测量仪测量接触角；计算上清液接触角和水接触角之差；

3) 通过标准品比对换算获得尿液样本中的糖含量，所述标准品为不同摩尔浓度的葡萄糖水溶液；

每次测定之间用复苏液对硅片处理5min。