[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒的变异毒株及其应用

说明书

本发明属于微生物技术领域，具体地说，涉及猪流行性腹泻病毒的变异毒株(PEDV‑HNCADC‑2017，保藏编号为CCTCC NO：V201766)及其应用。本发明所述变异毒株在10％血清培养基的VERO细胞中传代至156代，其TCID₅₀可达10^7.7/0.1mL，毒价较高，能与猪阳性血清和Balb/c小鼠阳性血清反应，免疫荧光反应较强。由其制备的弱毒活疫苗可用于猪流行性腹泻病的预防，抗体产生快，免疫后2周能产生较高的抗体水；由其制备的灭活疫苗安全性高，免疫后不排毒，可用于母猪和1日龄仔猪猪流行性腹泻病的防控。当采用二者联合免疫，可显著提高免疫效果。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体地说，涉及猪流行性腹泻病毒的变异毒株及其应用。

背景技术

猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea，PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)引起的以腹泻、呕吐和脱水为特征的猪肠道传染病。该病多发生在冬春寒冷季节，哺乳仔猪、架子猪或育肥猪等各年龄段均可发病，但哺乳仔猪发病和死亡最为严重，病死率高达90％～100％，给养猪业带来了严重的危害和经济损失。20世纪70年代，英国首次报道PED，以后相继在比利时、德国、加拿大、日本、瑞士等多个国家报道了该病的发生与流行。20世纪80年代后，该病开始在亚洲一些养猪国家流行，中国也多次报道了猪流行性腹泻，尤其是2010年以来，猪流行性腹泻在我国重新出现，并大范围爆发流行，表现为哺乳仔猪的高发病率和高死亡率，给我国养猪业造成严重经济损失。2013年以来，PED在美国猪群中爆发疫情，并迅速波及到整个美国和一些相邻的国家，经济损失在9～18亿美元。

PEDV属于冠状病毒科冠状病毒属α冠状病毒，该病毒属于单股正义RNA病毒，基因组全长约28Kb，至少编码7个开放阅读框，编码顺序为5’UTR-ORF1a-ORF1b-S-ORF3-E-M-N-3’UTR，分别编码主要结构蛋白：复制酶多聚蛋白lab(pplab)、纤突蛋白(S)、ORF3蛋白、小膜蛋白(E)、膜糖蛋白(M)和核衣壳蛋白(N)，其中N蛋白在病毒的感染细胞过程中产量最高，是病毒诱导机体免疫的主要优势抗原。

2014年以来，我国猪流行性腹泻病流行依然严重，主要危害初生仔猪，病死率较高，给养猪业带来了巨大的损失，当前主要采用病料返饲、自家苗或商品化疫苗防控该病，但是效果不一，易造成排毒散毒。因此，开发含有流行株猪流行性腹泻病毒抗原、在细胞中稳定传代、且免疫源性好的疫苗成为当前防控该病的首要任务。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种猪流行性腹泻病毒的变异毒株及其应用。

为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：

第一方面，本发明提供一种猪流行性腹泻病毒PEDV-HNCADC-2017株，已于2017年11月22日在湖北省武汉市武汉大学内的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏，其保藏编号为CCTCC NO：V201766。

所述猪流行性腹泻病毒PEDV-HNCADC-2017株作为一种猪流行性腹泻病毒的变异毒株，在10％血清培养基的VERO细胞中传代至156代，其TCID₅₀可达10^7.7/0.1mL，毒价较高，可用于制备猪流行性腹泻弱毒活疫苗或(和)灭活疫苗。

进一步地，基于所述猪流行性腹泻病毒PEDV-HNCADC-2017株的特性，本发明提供了所述猪流行性腹泻病毒PEDV-HNCADC-2017株在制备治疗/预防猪流行性腹泻的药物方面的应用。

作为一种具体的应用，所述药物可为疫苗，所述疫苗的抗原成分来自猪流行性腹泻病毒PEDV-HNCADC-2017株，包括但不限于其核衣壳蛋白。

进一步地，所述疫苗可为弱毒活疫苗或灭活疫苗。