[发明专利]免疫细胞免疫刺激应答性的测定、免疫细胞免疫突触形成能力的判定、以及细胞分析装置

说明书

本发明涉及免疫细胞免疫刺激应答性的测定、免疫细胞免疫突触形成能力的判定、以及细胞分析装置。测定免疫细胞的免疫刺激应答性的方法包含：(i)使测定对象的免疫细胞与免疫刺激因子接触的工序；(ii)使测定对象的免疫细胞形成与不同于测定对象的免疫细胞的物质的接触面的工序；(iii)使测定对象的免疫细胞与和接触面的表面抗原结合且能够产生光学信号的捕捉体接触的工序；(iv)检测由捕捉体产生的光学信号的工序；和(v)基于所检测出的光学信号，判定在检测光学信号之前解除了接触面的测定对象的免疫细胞是否有免疫刺激应答性的工序。

技术领域

本发明涉及测定免疫细胞的免疫刺激应答性的方法、判定免疫细胞的免疫突触形成能力的方法和细胞分析装置。

背景技术

免疫是生物体为了识别体内的自己或非己并排除非己而进行的细胞性和体液性的生物学反应的总称。免疫系统是生命活动中非常重要的生理机制。免疫系统的细胞通过分泌被称为细胞因子的蛋白质或者发挥细胞杀伤功能来参与免疫系统的活化、抑制。

免疫系统与可决定移植疗法成功与否的、对异体细胞的排斥反应密切相关。近年来，利用免疫系统对人类疾病进行治疗的免疫疗法的有用性已经显示，把握免疫系统的状态的重要性日益提高。

作为免疫系统的状态的分析方法，已知基于细胞因子分泌的分析方法。该分析方法需要在对免疫系统细胞进行免疫刺激后培养前述细胞，从免疫刺激后起至细胞因子的检测需要很长的时间(数十小时)和劳动量。

近年正在关注当免疫细胞与靶细胞接触时、在其接触面处形成于免疫细胞的结构体。由于该结构体在功能和形态学上类似于由神经细胞形成的突触结构，因此被称为免疫突触。已经提示了免疫突触与免疫刺激信号的增幅有关，并已知免疫突触形成能力与分泌细胞因子的能力有关(非专利文献1)。另外，已知免疫突触的形成与细胞因子分泌相比，是在短时间(几十分钟)内发生的(非专利文献1)。

作为测定免疫突触的方法，例如已知如下方法：使用玻璃基板上的免疫刺激因子刺激免疫细胞，在维持与玻璃基板的接触面的状态下，利用全内反射荧光显微镜测定T细胞的免疫突触(非专利文献2)。另外已知如下方法：在维持与靶细胞之间所形成的接触面的状态下，利用成像流式细胞仪测定T细胞的免疫突触(非专利文献3)。在非专利文献2中，免疫突触的检测以共刺激分子CD28为指标来进行；在非专利文献3中，免疫突触的检测以CD3为指标来进行。在非专利文献2和非专利文献3中，均在维持与对象物之间的接触面的状态下观察免疫细胞。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Carlin LM.等,Blood,vol.106,p.3874-3879,2005

非专利文献2：Yokosuka T.等,Immunity,vol.29,p.589-601,2008

非专利文献3：Hosseini BH.等,Proc Natl Acad Sci USA,vol.106,p.17852-17857,2009

发明内容

发明要解决的课题

迅速且简便地把握免疫系统的状态、即把握免疫系统的细胞对各种免疫刺激的应答性在进行涉及各种免疫系统的治疗中是非常重要的。

以往，为了分析免疫系统的细胞对免疫刺激的应答性，使用以细胞因子的分泌为指标的分析方法。但是，该分析方法在免疫刺激后至分泌细胞因子前必需对免疫细胞进行培养，烦杂且花费时间。

在为了测定免疫系统的细胞对各种免疫刺激的应答性而使用全内反射荧光显微镜的情况下，能测定的细胞数少，测定也费工夫，因此不能简便地进行测定，不适合于自动化装置。

因此，在该领域中，对于迅速且简便地把握免疫系统的细胞对各种免疫刺激的应答性存在需求。