[发明专利]一种巴氏染色液及应用方法

说明书

本发明公开了一种巴氏染色液及其应用，属于生物技术领域。具体的说该巴氏染色液包含细胞核染色液和胞浆染色液。本发明提供的巴氏染色液操作简便，染色均匀，染色后的细胞结构清晰，细胞着色鲜艳，易于临床病理诊断观察判断。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种巴氏染色液，同时本发明还涉及该染色液应用方法。

背景技术

在目前的疾病诊断过程中，病理诊断是诊断信息的重要来源，具有重要临床意义。巴氏染色法是病理切片和脱落细胞染色中最好的也是最常用的染色方法，该染色方法不但具有现实细胞核结构清晰，分色明显，透明度好，胞浆受色鲜艳等特点，还能处理后使标本不易脱色，可长久保存。巴氏染色试剂包含苏木素染液，橙黄染液，EA50染液，及95%乙醇，100%乙醇，无水乙醇等；巴氏染色操作流程为：95%乙醇固定（15min）→清水冲洗多次→苏木素染液（3-5min）→清水冲洗三次→蓝化→95%乙醇漂洗→橙黄染液（1-10s）→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50（3-5m）→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→无水乙醇漂洗→无水乙醇（2min）→二甲苯（2min）→中性树胶封片。

传统的巴氏颜色液配置复杂，染色手续繁杂，染色时间较长，染色结果受染色时间，漂洗时间，漂洗次数等多种因素影响，效果不稳定，影响病理诊断的判断。

发明内容

本发明为解决上述现有技术所存在的不足，提供一种快速染色的巴氏染色液及应用方法。该巴氏染色液配置简便，染色步骤简短，染后着色稳定，操作简单，分色与染色效果显著。

具体来说：该巴氏染色液含有细胞核染色液和细胞浆染色液。

细胞核染色液为改良苏木素染色液，每升染色液其组分为：醇50~150ml，冰乙酸5~40ml，苏木色精1~4g，硫酸铝钾2~25g，碘酸钠0.05~0.5g，余量为纯化水。

细胞浆染色液为OG-EA染色液，每升染液其组分为：亮绿0.1~1g，曙红微黄2~6g，无水乙醇400~700ml，磷钨酸0.5~4g，醇100~450ml，冰乙酸5~40ml，缓冲液2~50ml，橘黄2~8g，余量为纯化水。

上述染色液中的醇为：甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇及香豆素中的一种或几种组合；上述染色液中的缓冲液为Tris缓冲溶液，磷酸缓冲溶液，柠檬酸缓冲溶液中的一种或几种组合。

该巴氏染色液的使用方法为：

1）细胞学制片完成后，待湿固定；

2）流水清洗后使用所述改良苏木素染色液进行细胞核染色1~2分钟；

3）流水清洗后使用所述OG-EA染色液进行胞浆染色2~3分钟；

4）梯度酒精清洗脱水晾干后封片；

5）镜下阅片判读结果。

本发明提供的巴氏染色液，分别对细胞核和细胞浆染色着色快，1~2分钟就能完成很好着色，冲洗浮色方便简洁，染色步骤简短，染后着色稳定，操作简单，分色与染色效果显著。

附图说明

附图1实施例一镜检图片。

附图2实施例二镜检图片。

具体实施方式

实施例一：

改良苏木素染色液1，每升染色液其组分为：甲醇100ml，冰乙酸20ml，苏木色精2g，硫酸铝钾10g，碘酸钠0.1g，纯化水870ml。

OG-EA染色液1，每升染液其组分为：亮绿0.5g，曙红微黄2.5g，无水乙醇500ml，磷钨酸1g，乙醇200ml，冰乙酸20ml，磷酸缓冲液12ml，橘黄3g，纯化水265ml。