[发明专利]一种定量检测全血样品中待测物质的试剂盒及方法

说明书

本申请涉及免疫学检测领域。具体而言，本申请涉及一种定量检测全血样品中待测物质的试剂盒，其包含不溶性载体颗粒、特异性结合所述待测物质的抗体、和包含甜菜碱型表面活性剂的第一试剂组合物。此外，本申请还涉及一种检测全血样品中待测物质的存在或其量的方法，其包括在所述第一试剂组合物中将未溶血的全血样品与包被有特异性结合所述待测物质的抗体的不溶性载体颗粒接触以及测定该反应体系的浊度变化的步骤。

技术领域

本申请涉及免疫学检测领域。具体而言，本申请涉及一种定量检测全血样品中待测物质的试剂盒。此外，本申请还涉及一种检测全血样品中待测物质的存在或其量的方法。

背景技术

人类C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)为五聚体蛋白，由五个相同亚单位非共价联接，相对分子质量为115-140KD。CRP半寿期约15h，正常人的浓度很低，但在组织损伤、急性感染发生后6-8h开始升高，24-48h达峰值，可达正常值的几百倍甚至上千倍，升高幅度与感染程度成正比，炎症治愈后浓度迅速下降，一天可恢复正常水平。CRP持续增高提示机体存在慢性炎症或自身免疫疾病，在病毒感染时一般不会升高，其变化不受病人的个体差异、机体状态和治疗药物的影响。CRP对于鉴别诊断细菌还是病毒感染、监测疾病的活动情况、疗效的监控都具有很好的导向作用。

近年来，随着对CRP临床意义的深入研究，其在临床中的应用范围越来越广泛。目前，用于临床上检测的样本一般为血清或血浆，均需先对全血样本进行预分离红细胞再进行测试，需要专门的分离设备，操作步骤繁琐，费时费力，需要的样本量大，特别对于儿童和新生儿以及大面积烧伤患者等采血尤为困难，无法满足临床快速诊断的需求。为此，以全血为样本进行CRP的快速检测试剂显得异常迫切及重要。

目前市售的CRP测定试剂盒均为双试剂，由反应缓冲液1(R1)及CRP抗体偶联的乳胶颗粒试剂(R2)组成。试剂盒对于样本的检测，一般第一步先加R1对全血样本进行溶血，第二步再加R2进行反应，这样既影响检测速度，又增加试剂成本，两者预混一起由于液体环境的改变可能造成R2中的抗体失活，从而影响试剂的稳定性。

发明内容

本发明人经过大量的实验研究，出人意料地发现：在基于免疫比浊法的全血样品中待测物质(例如，C反应蛋白)的定量检测过程中，通过使用特定的试剂组合物，能够将未溶血的全血样品直接与抗体致敏的胶乳颗粒接触，从而对其浊度变化进行检测。基于这一发现，本发明人开发了新的用于全血样品中待测物质的定量检测试剂盒以及检测方法。

试剂盒

因此，在一个方面，本发明提供了一种试剂盒，其包含：

(a)不溶性载体颗粒；

(b)特异性结合所述待测物质的抗体；和

(c)第一试剂组合物，其包含甜菜碱型表面活性剂。

在某些优选的实施方案中，所述试剂盒用于免疫比浊法测定血液样品中待测物质的存在或其量。在某些优选的实施方案中，所述血液样品选自全血、血浆或血清。在某些优选的实施方案中，所述血液样品是抗凝全血，并且未溶血。

在某些优选的实施方案中，所述待测物质是血浆组分中的蛋白，例如C反应蛋白等。在某些实例性实施方案中，所述待测物质是C反应蛋白(CRP)。

在某些优选的实施方案中，所述甜菜碱型表面活性剂选自烷基甜菜碱、烷基酰胺甜菜碱、磺丙基甜菜碱、羟基磺丙基甜菜碱、磷酸脂甜菜碱，及其任意组合。在某些优选的实施方案中，所述第一试剂组合物包含3-磺丙基-十六烷基二甲甜菜碱。在某些优选的实施方案中，所述甜菜碱型表面活性剂的含量为0.01-4％(w/v)。在某些优选的实施方案中，所述甜菜碱型表面活性剂的含量为0.05-0.5％(w/v)。