[发明专利]以甜高粱汁为原料培养微藻的方法在审
| 申请号： | 201810305135.7 | 申请日： | 2018-04-08 |
| 公开（公告）号： | CN108315263A | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 宋晓金;蓝传增;王彦超;崔球;冯银刚;王森 | 申请（专利权）人： | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
| 主分类号： | C12N1/12 | 分类号： | C12N1/12;C12R1/89 |
| 代理公司： | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 | 代理人： | 傅培 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甜高粱汁 微藻 培养液 微藻培养 汁清液 酶解 总糖 高粱 蛋白酶 市场竞争力 超声处理 离心去除 廉价原料 衍生产品 原料成本 不溶物 复合酶 适量水 营养盐 灭菌 氮源 藻种 | ||
1.以甜高粱汁为原料培养微藻的方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)调节甜高粱汁的pH值至3.0-7.0，并向其中加入酸性蛋白酶或中性蛋白酶，使其酶活力为50-100u/L，超声处理30-60min，然后在5000-10000rpm的速度离心10-15min，去除不溶物，得到处理后的甜高粱汁，待用；
(2)将适量的复合酶加入到步骤(1)得到的甜高粱汁中，使蔗糖酶的酶活力为100-500u/L，葡萄糖苷酶的酶活力为50-150u/L，纤维素酶的酶活力为10-50u/L；搅拌均匀，调节溶液的pH值为4.0-6.5，在30-70℃的温度条件下，保持20-60min，得到酶解后的高粱汁清液，其总糖浓度为12％-16％；
(3)向步骤(2)得到的酶解后的高粱汁清液中加入适量水，使总糖浓度为0.1％-4％；然后添加氮源和其他营养盐，使溶液中碳氮比为5:1-40:1；调至pH值至6.0-7.0，灭菌，得到培养液；
(4)将藻种接入步骤(3)得到的培养液中进行微藻培养，接种量为5-10％；设定培养条件为：温度20-30℃，搅拌转速50-500r/min，通气量0.3-2.0VVM，培养时间为4-9天，培养过程中根据需要添加补充液，保证微藻的生长。
2.根据权利要求1所述的以甜高粱汁为原料培养微藻的方法，其特征在于：步骤(4)所述的微藻培养的方式为兼养培养或异养培养。
3.根据权利要求1所述的以甜高粱汁为原料培养微藻的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的添加酸性蛋白酶时的pH值为3.0-5.0，添加中性蛋白酶时的pH值为5.0-7.0。
4.根据权利要求1所述的以甜高粱汁为原料培养微藻的方法，其特征在于：步骤(2)所制备的高粱汁清液可作为步骤(4)所述的补充液；作为补充液时，所述高粱汁清液的总糖浓度是培养液中初始糖浓度的3-5倍。
5.根据权利要求1所述的以甜高粱汁为原料培养微藻的方法，其特征在于：步骤(3)中所述的氮源为硫酸铵、碳酸氢铵、氯化铵、硝酸钾、尿素、酵母粉、蛋白胨和玉米浆中的一种或几种；所述的其他营养盐为磷酸盐、钾盐、镁盐和铁盐中的一种或几种。
6.根据权利要求1所述的以甜高粱汁为原料培养微藻的方法，其特征在于：步骤(4)中所述的藻种为微拟球藻、栅藻、小球藻和寇氏隐甲藻中的一种。
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