[发明专利]一种植物组织软化剂及使用方法在审
申请号: | 201810301924.3 | 申请日: | 2018-04-04 |
公开(公告)号: | CN108693010A | 公开(公告)日: | 2018-10-23 |
发明(设计)人: | 黄双;钱庄;白文霞;徐明智;严鹏 | 申请(专利权)人: | 南京烁朴生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30 |
代理公司: | 南京苏创专利代理事务所(普通合伙) 32273 | 代理人: | 王华 |
地址: | 211135 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 软化 软化剂 甘油 蒸馏水 石蜡切片 乙二胺 种植物 刺激性气味 挥发性 发明配置 时间控制 时间增加 植物组织 固定液 葡萄根 软化液 离体 移除 乙醇 备用 浸泡 酒精 计量 | ||
本发明公开了一种植物组织软化剂,包括:乙二胺、甘油、95%酒精、蒸馏水。其使用方法,包括以下步骤:在95%的乙醇中,加入乙二胺,并搅拌混合均匀,然后再依次加入计量的甘油和蒸馏水,搅拌均匀,备用;将植物组织离体后经过FAA固定液固定48h以上后,将固定液移除,并加入软化剂进行软化,软化后的组织在进行石蜡切片,软化剂的加入量和软化时间控制如下:软化剂的加入量以将组织完全浸泡为准,软化时间以4mm直径葡萄根为基准软化7天,组织直径每增加1mm,软化时间增加1天。本发明配置方法简便,挥发性小,无刺激性气味,毒性小,软化时间较甘油软化液缩短两周,软化时间可根据组织大小精确把握,软化后的组织适于石蜡切片。
技术领域
本发明属于涉及组织学、细胞学、病理学和临床病例检测学,尤其涉及植物组织的软化剂。
背景技术
对木质化较高的根、茎等植物组织进行石蜡切片时,组织较硬脆,需要对组织进行相应的软化后,方能得到组织薄片。传统软化剂多以氢氟酸或甘油的水溶液为软化剂,甘油溶液软化时间较长,一般需3周以上;氢氟酸腐蚀性强、毒性大;二者对组织的软化程度和切片效果多无法准确掌控,不利于广泛应用。
发明内容
本发明针对现有技术的不足,提供一种植物组织软化剂及使用方法,本软化剂配置方法简便,挥发性小,无刺激性气味,毒性小,软化时间较甘油软化液缩短两周,软化时间可根据组织大小精确把握,软化后的组织适于石蜡切片。
为实现以上的技术目的,本发明将采取以下的技术方案:一种植物组织软化剂,包括以下含量的组份:
乙二胺:10%(V/V)
甘油:20%(V/V)
95%酒精:50%(V/V)
蒸馏水:20%(V/V)。
本发明还提供了一种基于上述植物组织软化剂的使用方法,包括以下步骤:
(1)在500ml的95%的乙醇中,量取并加入乙二胺,并搅拌混合均匀,然后再依次加入计量的甘油和蒸馏水,搅拌均匀,备用;
(2)将植物组织离体后经过FAA固定液固定48h以上后,将固定液移除,并加入步骤(1)得到的软化剂进行软化,软化后的组织在进行石蜡切片,软化剂的加入量和软化时间控制如下:软化剂的加入量以将组织完全浸泡为准,软化时间以4mm直径葡萄根为基准软化7天,组织直径每增加1mm,软化时间增加1天。
根据以上的技术方案,相对于现有技术,本发明配置方法简便,挥发性小,无刺激性气味,毒性小,软化时间较甘油软化液缩短两周,软化时间可根据组织大小精确把握,软化后的组织适于石蜡切片。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐明本发明,应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围,在阅读了本发明之后,本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。
本发明实施例中的植物组织软化剂,配置所需试剂如下:
乙二胺:10%(V/V)
甘油:20%(V/V)
95%酒精:50%(V/V)
蒸馏水:20%(V/V)
精密量取乙二胺100ml,与500ml 95%乙醇进行混合,搅拌均匀,再精密量取200ml甘油,200ml蒸馏水加入其中,搅拌均匀,静置片刻后,便可使用。
植物组织离体后经FAA固定液固定48h后,将固定液换成足量特制软化剂,根据组织大小,以4mm直径葡萄根为基准软化7天,每增加1mm直径,软化时间增加一天。软化完成的组织即可进行常规石蜡切片。
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