[发明专利]一种模拟生物组织薄片、其制备方法及其应用与装置

权利要求书

1.一种制备模拟生物组织薄片的方法，包括以下步骤：

(i)赋形膜材的加工：选取适宜高分子聚合物材料刻制塑形用模具，确定模拟生物组织的形状、尺寸以及样本布局；

(ii)含化合物的水性分散介质的制备：向水性介质中加入适量已知浓度的标准化合物溶液，超声除去水性分散介质中的气泡，待用；

(iii)组织料液的制备：将生物组织的分散处理，确定生物组织材料的质量和水性分散介质体积的料液比，使团块状的生物组织样品转为均匀分散的生物组织料液，以确保沉积形成的模拟组织在组织形态、组织密度一致；

(iv)细胞悬液的制备：采用细胞筛分、分级的方法制备的完整的离体细胞，并采用水性分散介质配制成一定浓度的细胞悬液；

(v)组织料液与细胞悬液的混合：将组织料液与细胞悬液按一定比例充分混合；

(vi)混合液的共沉积：准确吸取一定体积的组织料液与细胞悬液混合液，采取手动点样或自动化点样的方式，将混合液加载于贴有赋形膜材的载体底物上，使组织成分、细胞、目标分子在沉积的过程中完成塑形处理；

(vii)模拟组织的固定成型：通过常温自然干燥、常温减压干燥或惰性干燥气流通干燥的方式，除去模拟生物组织中的水分，使模拟组织薄片与载体底物粘贴紧密。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述模拟生物组织薄片，包括生物组织材料和组织细胞，并含有已知量的标准化合物分子。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，(i)项中所述赋形膜材以低通透性的粘性薄膜作为膜材；赋形膜材的加工，采用机械切割或激光刻蚀方式实现。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，(i)项中所述赋形膜材用于限定模拟组织样本的形态、尺寸及厚度，该赋形膜材尺寸可根据具体实验需要而准确刻制，单个样本呈规则矩形或正方形，或制作成多样本槽阵列模式。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，(i)项中所述水性分散介质包括超纯水、等渗生理盐水、磷酸盐缓冲液、含天然高分子的水凝胶溶液，所述的天然高分子包括胶原蛋白或纤维蛋白。

6.根据权利要求1所述所述的制备方法，其特征在于，(iii)项中是将组织细胞与细胞间隙组织预先通过细胞筛分、分级方式进行物理分离，组织细胞经过纯化、富集，液氮冻存，待临用时重新分散至适宜浓度。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，通过对生物组织材料的质量和水性分散介质体积的料液比的准确控制，可以实现模拟生物组织中组织密度与实际生物组织一致，进而使模拟组织的基质与实际组织相近。

8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法制备得到的模拟生物组织薄片，其特征在于，所述的模拟生物组织薄片组成包括：确定添加量的标准化合物分子，来源于被模拟器官或组织的生物组织材料、组织细胞。

9.根据权利要求8所述的模拟生物组织薄片，其特征在于，所述的标准化合物分子选自生物大分子，或生物内源性小分子代谢物，或外源性添加物；所述的生物大分子包括蛋白质、多肽、多糖，所述的生物内源性小分子代谢物包括脂类、氨基酸、脂肪酸、寡糖、单糖、核苷，所述的外源性添加物包括化学合成药物及其代谢产物、中药草天然产物。

10.根据权利要求8所述的模拟生物组织薄片，其特征在于，所述的生物组织材料指来源于某脏器或组织，起到支撑、缓冲、保护作用的细胞间质成分，所述生物组织材料包括纤维蛋白、胶原蛋白、层黏蛋白。

11.根据权利要求8所述的模拟生物组织薄片，其特征在于，所述的组织细胞指来源于某一特定器官或组织，经过细胞筛选、分级后制备得到的细胞或不同类别细胞的集合。