[发明专利]一种双抗夹心胶体金检测试剂盒、及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种双抗夹心法胶体金检测的试剂盒，其中，所述试剂盒包括双抗夹心法胶体金测试纸条和样品处理液；所述双抗夹心法胶体金测试纸条上的金标抗体使用金标抗体封闭液处理，所述金标抗体封闭液由pH7.4 0.1M PBS溶液、0.2%～1.0%W/V大分子蛋白和0.02%～1.0%W/VTween-20组成，所述大分子蛋白为BSA、OVA、胎牛血清、脱脂奶中的任一种；

所述金标抗体使用金标抗体稀释液稀释，所述金标抗体稀释液由pH7.4 0.1M PBS溶液、0.1%V/V PEG4000和0.02%V/V Proclin300组成，或由pH7.4 0.1M PBS溶液、0.1%V/VPEG6000、0.02%V/V Proclin300组成；以及

所述双抗夹心法胶体金测试纸条上的固定抗体使用固定抗体稀释液稀释，所述固定抗体稀释液由pH7.4 0.1M PBS溶液、0.5%V/V糖类稳定剂和0.1%V/V Triton-X 100组成，所述糖类稳定剂为蔗糖、海藻糖、葡萄糖、山梨醇中的任一种。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述金标抗体封闭液为pH7.4 0.1M PBS溶液、0.2%～1.0%W/V BSA、0.02%～1.0%W/V Tween-20。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述固定抗体稀释液为pH7.4 0.1M PBS溶液、0.5%V/V蔗糖、0.1%V/V Triton-X 100。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述试剂盒包括胶体金检测试纸条，所述胶体金检测试纸条上包被有金标抗体，所述金标抗体标记的胶体金其胶体金溶液最大吸收峰为515～530nm、最大吸收峰对应的OD_max值为0.9～1.1、0.75×OD_max值对应的吸收峰峰间距为55～72nm。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其中，所述胶体金检测试纸条包括底板，所述底板具有第一端和第二端，并且沿所述第一端向第二端的方向上依次有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，所述金标垫上吸附有金标抗体，所述硝酸纤维素膜上近所述底板第二端的位置包括检测线和质控线，所述检测线上固定化有固定抗体，所述质控线上固定化有羊抗鼠二抗或羊抗鼠多抗，所述硝酸纤维素膜与金标垫接触或与样品垫、金标垫接触使得抗原与所述金标抗体的结合体能在其上向底板第二端迁移。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其中，所述金标抗体溶解于金标抗体稀释液中的浓度为10～250μg/ml。

7.根据权利要求5所述的试剂盒，其中，所述金标抗体溶解于金标抗体稀释液中的浓度为25～100μg/ml；所述固定抗体、羊抗鼠二抗或羊抗鼠多抗分别经固定抗体稀释液稀释至0.5～3mg/ml、1～3mg/ml。

8.根据权利要求5所述的试剂盒，其中，所述检测线和质控线两线间距≥5mm。