[发明专利]一种准确简便鉴定沼泽山雀性别的引物及鉴定方法在审
| 申请号： | 201810288034.3 | 申请日： | 2018-04-03 |
| 公开（公告）号： | CN108315443A | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 万冬梅;张雷;王娟;张海旺;王伟荣;崇凌志;韩梅 | 申请（专利权）人： | 辽宁大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 沈阳杰克知识产权代理有限公司 21207 | 代理人： | 金春华 |
| 地址： | 110000 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 沼泽 引物 基因组总DNA 扩增产物 条带 琼脂糖凝胶电泳检测 分子生物学领域 凝胶成像仪 带型判断 可重复性 特异序列 仪器要求 带型 扩增 拍照 记录 | ||
【权利要求书】：
1.一种准确简便鉴定沼泽山雀性别的引物，其特征在于，所述的引物的DNA序列为：
2550F 5’-GTTACTGATTCGTCTACGAGA-3’
RevP1 5’-TGAGGAAACAAGCACTGGAC-3’。
2.权利要求1所述的引物在鉴定沼泽山雀性别中的应用。
3.一种准确简便鉴定沼泽山雀性别的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)提取沼泽山雀的基因组总DNA；
2)以基因组总DNA为模板，利用权利要求1所述的引物进行PCR扩增反应，获得扩增产物；
3)将获得扩增产物进行2％琼脂糖凝胶电泳检测，用Dolphin-Doc凝胶成像仪进行拍照记录，根据带型判断沼泽山雀的性别。
4.根据权利要求3所述的一种准确简便鉴定沼泽山雀性别的方法，其特征在于，步骤2)，
5.根据权利要求3所述的一种准确简便鉴定沼泽山雀性别的方法，其特征在于，步骤2)，PCR扩增反应程序为：94℃/7min；94℃/30s，58℃/30s，72℃/45s，30个循环；72℃/7min，4℃保存。
6.根据权利要求3所述的一种准确简便鉴定沼泽山雀性别的方法，其特征在于，步骤3)带型判断标准为：雌性为两条带，雄性为一条带。
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