[发明专利]一种(S)-羰基还原酶及其编码基因与应用

权利要求书

1.一种来源于红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)的羰基还原酶基因，其核苷酸序列为如下1)-3)中任一所述的基因：

1)SEQ ID NO：1所示的基因；

2)在高严谨条件下与1)所述基因杂交且编码相同蛋白的基因；

3)与1)或2)所述的基因具有90％以上的同源性且编码相同蛋白的基因；

上述高严谨条件为用0.1×SSPE或SSC，0.1％SDS的溶液，在DNA或者RNA杂交实验中65℃下杂交并洗膜。

2.根据权利要求1所述的基因，其特征在于，所述SEQ ID NO：1核苷酸序列由红平红球菌总DNA为模板，以SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示引物扩增得到。

3.一种由权利要求1或2所述羰基还原酶基因编码的(S)-羰基还原酶ReADH。

4.根据权利要求3所述的(S)-羰基还原酶ReADH，其特征在于，是如下a或b的蛋白质：

a、SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

b、SEQ ID NO：2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有羰基还原酶活性的衍生蛋白质。

5.根据权利要求3所述的(S)-羰基还原酶ReADH，其特征在于，所述羰基还原酶ReADH的氨基末端或羧基末端连接有下列标签：Poly-Arg、Poly-His、FLAG、Strep-tagII或c-myc。

6.含有权利要求1或2所述(S)-羰基还原酶基因的表达盒、重组载体、转基因细胞系及重组菌。

7.权利要求3～5任意一项所述的(S)-羰基还原酶ReADH作为生物催化剂在还原苯乙酮生成(S)-α-苯乙醇中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用包括以下步骤：

将所述羰基还原酶ReADH在NADH或NADPH的存在下对底物苯乙酮进行催化反应，得到(S)-α-苯乙醇，所述催化反应的温度为30～45℃，催化反应的pH值为4.5～7.5，催化反应的时间为8～24h。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述羰基还原酶ReADH与所述苯乙酮的用量比为(1～5)U:(0.1～500)mmol。

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述NADH或NADPH与所述苯乙酮的用量比为(0.5～1)mg:(0.1～200)mmol。