[发明专利]一种复合微生物制剂及其在防治疫霉中的用途

权利要求书

1.一种复合微生物制剂，其特征在于，所述复合微生物制剂按照如下工艺制备而得：将康氏木霉-丝孢酵母混合发酵液、沼泽红假单胞菌发酵液、枯草芽孢杆菌发酵液按照5-8:2-3:2-3的体积比混合均匀，然后真空冷冻干燥制得菌粉，即得；所述康氏木霉(Trichoderma koningii)为ATCC66766；所述丝孢酵母(Trichosproom sp.)为ATCC201110；所述沼泽红假单胞菌（Rhodopseudanonas palustris）为ATCC 17001；所述枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）为ATCC 6633。

2.根据权利要求1所述的微生物制剂，其特征在于，所述康氏木霉-丝孢酵母混合发酵液按照如下步骤制备而得：

1）将丝孢酵母划线接种在YPDA培养基上培养，得到单菌落；挑取单菌落接种到YPD液体培养基上培养，30℃培养24h，得到丝孢酵母种子液，待用；

2）将康氏木霉划线接种在PDA培养基上培养，得到单菌落；挑取单菌落接种到PDA液体培养基上培养，30℃、200rpm摇床培养36h，得到康氏木霉种子液，待用；

3）先将康氏木霉种子液按照10%的接种量接入到发酵培养基中，30℃培养6小时，然后将丝孢酵母种子液按照5%的接种量接入到发酵培养基，继续以30℃培养18小时，得到康氏木霉-丝孢酵母混合发酵液；所述发酵培养基的组分为：玉米秸秆粉16g/L、豆粕10g/L、氯化铵5g/L、磷酸氢二钾2g/L、磷酸二氢钾1g/L、氯化钠0.5g/L、硫酸镁0.1g/L、硫酸亚铁0.01g/L。

3.根据权利要求1所述的微生物制剂，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌发酵液按照如下步骤制备而得：

将沼泽红假单胞菌在LB平板上划线培养，得到单菌落；挑取单菌落接入种子培养基上培养至对数生长期，培养条件为：30-32℃，光照3000-4000Lux，制成种子液；然后按照10%的接种量接入到发酵培养基中，30-32℃培养24h，得到沼泽红假单胞菌发酵液；所述种子培养基和发酵培养基的组分均为：葡萄糖 8g/L、酵母提取物5g/L、硫酸铵1g/L、磷酸二氢钾0.2g/L、磷酸氢二钾0.2g/L、碳酸氢钠0.1g/L、硫酸镁0.01g/L。

4.根据权利要求1所述的微生物制剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌发酵液按照如下步骤制备而得：

将枯草芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上划线培养，得到单菌落；挑取单菌落接入种子培养基上，30℃、200rpm摇床培养至对数生长期，制成种子液；然后按照8%的接种量接入到发酵培养基中，30℃培养36h，得到枯草芽孢杆菌发酵液。