[发明专利]鸭传染性浆膜炎活疫苗及其制备方法

权利要求书

1.鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer)GD12株，已于中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为：CCTCC NO：M 2016161。

2.权利要求1所述鸭疫里默氏杆菌GD12株在制备鸭传染性浆膜炎活疫苗中的应用。

3.鸭传染性浆膜炎活疫苗，其特征在于，该活疫苗中含有权利要求1所述的鸭疫里默氏杆菌GD12株。

4.根据权利要求3所述的鸭传染性浆膜炎活疫苗，其特征在于，该活疫苗中还含有冻干保护剂。

5.根据权利要求4所述的鸭传染性浆膜炎活疫苗，其特征在于，所述冻干保护剂的配方为：明胶2～3％，蔗糖5～6％，硫脲2～4％，余量为水，所述百分比为质量体积百分比。

6.一种鸭传染性浆膜炎活疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将权利要求1所述的鸭疫里默氏杆菌GD12株进行扩大培养，收获扩大培养后的菌液；

2)将上步扩大培养后的菌液离心浓缩；

3)将离心后的菌液加冻干保护剂混匀，冷冻真空干燥后即得。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤1)的具体操作为：将鸭疫里默氏杆菌GD12株菌种划线接种于含新生牛血清的TSA平板，36.5～37.5℃培养16～24h，挑单菌落接种于含新生牛血清的TSB培养基中，于36.5～37.5℃，160～180rpm/min震荡培养16～24h既得种子液，再将种子液按体积比1:80～150接种于含新生牛血清的TSB培养基中扩大培养，于36.5～37.5℃，160～180rpm/min震荡培养16～24h，收获扩大培养后的菌液。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤2)的具体操作为：将扩大培养后的菌液置于无菌离心管中，于5000～8000rpm/min条件下离心8～12min，收获细菌沉淀，按体积比45～55:1浓缩后溶于培养液中。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤3)的具体操作为：将浓缩后的菌液与冻干保护剂按体积比0.8～1.2:1进行混匀，–70℃预冻12～16h，转置冷冻真空干燥机中冻干。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述冻干保护剂配方为明胶2～3％，蔗糖5～6％，硫脲2～4％，余量为水，所述百分比为质量体积百分比；将该配方物质混匀后经高压灭菌后制得。