[发明专利]一种食品中苏丹红I胶体金刚碳检测试纸条的制备方法

说明书

本发明涉及一种食品中苏丹红I胶体金刚碳检测试纸条的制备方法，该方法用黑色标记物胶体金刚碳代替胶体金显色，有明显的优势，检测线为微红色为阳性，变黑则为阴性。这样既保持了免疫法的快速，操作简单等有点，又提高了灵敏度和特异性。

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，尤其涉及一种食品中苏丹红I胶体金刚碳检测试纸条的制备方法。

背景技术

苏丹红类物质含有氮氮双键(偶氮基)，即结构式中的-N＝N-，与连接在其两端的苯环一起构成发色基团。偶氮基与芳香结构构成的偶氮苯大共轭体系能够吸收一定波长的可见光，故含有偶氮苯体系的物质能显现出一定的颜色。苏丹红I(结构式如下)，学名：1-苯基偶氮-2-萘酚(1-phenylazo-2-naphthalenol)，分子结构式为C6H5N＝NC10H6OH，分子量248.28。

苏丹红为亲脂性偶氮染料，不溶于水，主要用于油彩、机油、蜡和鞋油等产品的染色。由于用苏丹红染色后的食品颜色非常鲜艳且不易褪色，能引起人们强烈的食欲，一些不法食品企业把苏丹红添加到食品中。常见的添加苏丹红的食品有辣椒粉、辣椒油、红豆腐，红心禽蛋等。

人体摄入苏丹红I后，不易排出，国际癌症研究机构(International Agency forResearchonCancer，IARC)将苏丹红I归为三类致癌物，即动物致癌物，主要基于体外和动物试验的研究结果，肝脏是苏丹红I产生致癌性的主要靶器官，此外还可引起膀胱、脾脏等脏器的肿瘤。所以对不法分子将苏丹红I用于食品加工生产的行为要坚决抵制，有关部门坚决查处。

对苏丹红I的检测目前分为两种：定量检测和快速检测，定量检测主要有色谱法，光谱法，分光光度法，这种方法准确、定量分析，但是不适合现场快速检测，胶体金层析方法和ELSIA方法是比较快速的检测方法。所以在打击犯罪和现场查处执法方面很有效果。

胶体金层析方法最为快速，操作最为简单，但是由于免疫胶体金方法的原理所致，检测线包埋的苏丹红I-BSA抗原为浅红色细线，所以当红色的免疫胶体金与苏丹红I-BSA结合呈现的红色时，二者有视觉上的重叠，很难区分阴阳性，或者只能通过深浅判断，严重影响灵敏度；另一方面红色基质对检测线的判断也是有一定的影响，从而影响特异性。

发明内容

针对现阶段的苏丹红I胶体金检测试纸条存在的问题，本发明提供了一种食品中苏丹红I胶体金刚碳检测试纸条的制备方法，该方法解决了传统试纸条上面T线红色与胶体金红色重叠的问题，同时对其它试纸条的生产具有一定的参考价值，而且能够清晰判断、快速、准确的判断，操作简单。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供了一种食品中苏丹红I胶体金刚碳检测试纸条的制备方法，它包括以下步骤：

S1：胶体碳金钢化：选择粒径在10-100nm之间胶体碳溶液，接着在3个大气压的压力下煮沸胶体碳溶液30-40min，40-60KHZ然后超声30-40min，得到均匀分散成的胶体金刚碳溶液，最后将其稀释成标准浓度的胶体金刚碳溶液；

S2：取粒径为40nm的胶体金钢碳溶液100mL，调至pH7.2，分别标记抗体得到碳标抗体溶液；

S3：先将碳标抗体溶液于常温、转速为1200-1500rpm条件下离心20-30min，弃去由凝聚的碳颗粒形成的沉淀，取黑色上清溶液于4℃再8000r/min离心30min，离心后溶液分为三层：透明上清液、管底可流动的黑色沉淀及管底壁上黑色致密的毯子碳颗粒层，将可流动的黑色沉淀转移到另外一个离心管中，用重悬液重悬至原量0.8倍，加入0.1％的叠氮钠4℃保存备用；