[发明专利]Orai1蛋白和/或STIM1蛋白作为脑卒中生物标志物的用途

说明书

本发明公开了一种Orai1蛋白和/或STIM1蛋白，特别是外周血血浆中的外泌体上的Orai1蛋白和/或STIM1蛋白，作为脑卒中生物标志物的用途。具体地，本发明涉及Orai1蛋白和/或STIM1蛋白在制备用于脑卒中诊断、罹患风险评估、患病严重程度的诊断、治疗效果的评估、预后恢复的判断等的产品中的应用，不仅可以快速有效地进行脑卒中的早期诊断、风险评估和预警，还可以为后期患病严重程度及治疗效果的评估、预后的判断提供重要依据，辅助医生的治疗方案。另外，本发明所述Orai1、STIM1蛋白还可以为药物治疗等临床应用提供治疗靶点和重要依据。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种Orai1蛋白和/或STIM1蛋白，特别是外周血血浆中的外泌体上的Orai1蛋白和/或STIM1蛋白，作为脑卒中生物标志物的用途。

背景技术

缺血性脑卒中(cerebral ischemic stoke)是指脑部血管狭窄或者闭塞导致供血障碍，从而导致脑组织缺血、缺氧，进一步导致局限性脑组织的缺血性坏死或软化。缺血性脑卒中主要包括脑血栓形成和脑栓塞两种，同时缺血性脑卒中也可由血管壁病变、血管压迫、心脏疾病、血流动力学改变以及血液成分的改变等条件引发。缺血性脑卒中的临床表现比较复杂，取决于梗死部位和梗死体积，不同类型的脑缺血有着不同的临床表现，主要以局灶性神经功能缺损的症状和体征为特征，如偏瘫、偏身感觉障碍、失语、共济失调等，还有部分可表现为头痛、呕吐、昏迷等全脑症状。2010年全球疾病负担研究(GBD 2010)(N Engl JMed,2013,369:448-457)，将脑卒中列为影响寿命、导致伤残的第三大原因，脑卒中已经成为一个全球性的健康问题。根据相关部门最新统计显示，脑卒中已成为中国第一致死原因，我国每年新发脑卒中患者250万人，目前脑卒中患者至少700万人，致残率高达75％。脑卒中主要分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中两大类，根据我国卫生部统计，缺血性脑卒中占脑卒中病人总数的45.5％-75.9％。由此可见，能够预防和及时诊断脑卒中有着积极的医学及社会意义。

经研究发现，基质相互作用分子1(Stromal interaction molecules 1，STIM1)和细胞膜蛋白Orai1所构成的库操控的钙通道(store-operated calcium channels，SOCC)存在于人外周血血浆中提取的外泌体中。STIM1蛋白和Orai1蛋白是血小板激活的主要通路之一(Progress in Physiological Sciences,2012,43:417-421)，且共同参与GPVI诱导的库操控的钙流入(store-operated Ca²⁺entry SOCE)、凝血酶源激活和血栓形成(J BiolChem,2010,285,23:629-23638)。Orai1是位于质膜上的四次跨膜蛋白，是钙释放激活钙通道(CRAC)的主要组成蛋白。Orai1高表达于血小板，研究发现，敲除Orai1后的小鼠与野生型小鼠相比，出现严重的CRAC通道缺陷，激动诱导性钙应答，活化受损和血栓形成(Blood,2009,113:2056-63)。Orail蛋白的变异会导致免疫力缺陷，肌肉发育不全。Orail蛋白敲除会在体外实验中导致血小板聚集降低和在体内导致血栓形成(Ann N Y Acad Sci.2015,1356(1):45-79)。同时STIM1也高表达于血小板，研究发现，敲除STIM1后的小鼠与野生型小鼠相比，表现出更高的出生后致死率和明显的发育迟缓(J Exp Med,2008,205,1583-1591)。在高剪切力下，与正常组小鼠相比敲除STIM1组小鼠的血小板表现出黏附能力减弱、血栓覆盖率减弱、血栓体积减小(J Exp Med,2008,205,1583-1591)。敲除STIM1的血小板可以显著抑制血小板胶原受体糖蛋白VI依赖性钙信号，导致磷脂酰丝氨酸(血小板凝血活性所必需成分)的暴露减少，从而抑制血栓形成(J Exp Med,2008,205,1583-1591)。由此可见，Orai1蛋白和STIM1蛋白在血小板的生物活动和血栓形成的过程中起着至关重要的作用。因此Orai1蛋白和STIM1蛋白有条件成为检测血小板活性的生物标记。